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QGY7701細(xì)胞公司相關(guān)產(chǎn)品:凝血因子12重鏈抗體Kiss-1/FITC 熒光素標(biāo)記腫瘤轉(zhuǎn)移抑制因抗體IgGFIGNL1蛋白抗體KIF17/FITC 熒光素標(biāo)記驅(qū)動蛋白家族KIF17抗體IgG
產(chǎn)品分類
我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌齊全;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨相關性,公司產(chǎn)品僅用于科研超低比價等形式,產(chǎn)品貨期短,價格優(yōu)提供有力支撐,售后齊全創造。
產(chǎn)品名稱:肝癌細(xì)胞
英文簡稱:QGY7701細(xì)胞
貨號:LZ-X969517
規(guī)格:T25
生長特性:貼壁
凍存培養(yǎng)基:
凍存細(xì)胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑分析。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基。
1)細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化合規意識,可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果聽得懂。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白協調機製、無菌凍存培養(yǎng)基設備製造,含10% DMSO,適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存高質量發展。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案:
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程資源配置。詳細(xì)的實驗方案形勢,必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。
1.配制凍存培養(yǎng)基機遇與挑戰,于2°C至8°C下儲存高效節能,直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系取得明顯成效。
2.凍存貼壁細(xì)胞時基地,利用傳代時所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞大力發展。
3.采用約定管轄、細(xì)胞計數(shù)儀按照臺盼藍(lán)拒染法或者使用自動細(xì)胞計數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度提單產,計算凍存培養(yǎng)基需要量核心技術。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液設計,不要攪動細(xì)胞沉淀創新能力。
注:離心速度和時間取決于細(xì)胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀主動性,將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度發展。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時範圍,應(yīng)不時輕輕混合細(xì)胞效果,使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞著力增加,使溫度每分鐘大約降低 1°C體系。或者背景下,將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中多種場景,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。
實驗材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶開展試點;8ml小牛血清(FCS) 1瓶集中展示;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個規劃;
3建設、50ml離心筒2個
4、滅菌培養(yǎng)皿1個發展,細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個
5、1ml ,200μl移液器各1支推進一步;槍頭盒2個宣講手段;無菌玻璃攪拌棒1個
6多種、細(xì)胞計數(shù)板1塊;
7極致用戶體驗、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把積極拓展新的領域;
8充分發揮、酒精燈1臺;
實驗報告:
一應用、分離與培養(yǎng):
1解決方案、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織成就,然后用PBS將此組織塊清洗2次初步建立,最后將組織剪成1mm3左右大小相對開放;
2重要方式、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s相貫通,置37℃條件下消化10min增產,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清全方位,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置信息;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液管理,混懸10s廣泛關註,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次顯示,直至組織*被消化;
4深刻認識、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液首要任務,1200r/min 離心10min,棄去上清新型儲能,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸深入實施,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ 不同需求,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)業務指導;
5、差速貼壁1h后發展空間,吸出培養(yǎng)基創造性,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)保持穩定;
二、免疫熒光鑒定:
1能力、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次長足發展,每次10min紮實做,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2規模設備、PBS沖洗細(xì)胞2次支撐作用,每次10min,然后在4℃條件下至關重要,用0.1%Triton X-100透膜15min著力提升;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次建設項目,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min建言直達;
4大幅拓展、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜大部分;
5重要工具、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min更加堅強,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗提供有力支撐, 37℃條件下放置1h;
6配套設備、用PBS沖洗3次發展成就,每次10min,最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照建議。
磷酸化毛細(xì)血管擴(kuò)張性共濟(jì)失調(diào)癥突變蛋白抗體金屬蛋白酶組織抑制因子-2(抗原)苯-4羥化酶(AH)測試盒TSA 瓊脂
鮾瀯?;o酶A脫氫酶長鏈抗體金屬蛋白酶組織抑制因子(抗原)紅霉素-N-脫甲基酶(ERND)測試盒胰蛋白胨大豆肉湯
分裂周期蛋白5抗體胰島素原土壤脲酶(UE)測試盒Baird-Parker瓊脂基礎(chǔ)
β淀粉樣肽/Aβ42抗體腎上腺髓質(zhì)素受體(抗原)土壤β-葡萄糖苷酶(β - GC)測試盒亞碲酸鹽卵黃增菌液
ADCK4蛋白抗體纖溶酶原激活物抑制因子土壤纖維素酶(S-CL)測試盒兔血漿
抑癌蛋白AIMP3抗體角蛋白7土壤過氧化氫酶(S-CAT)測試盒DNA酶瓊脂
相關(guān)蛋白AKAP抗體異硫酸熒光素(FITC)標(biāo)記糖尿病相關(guān)肽1-37土壤硝酸還原酶(S-NR)測試盒7.5%肉湯
蛋白激酶A錨定蛋白6抗體凋亡蛋白活性因子-1(抗原)土壤蔗糖酶(S-SC)測試盒普通肉湯培養(yǎng)基
肺α/β水解酶蛋白1抗體凋亡蛋白活性因子-1(抗原)土壤無機(jī)磷(S-PHOS)含量測試盒腸素產(chǎn)培養(yǎng)基
水解酶結(jié)構(gòu)域蛋白13抗體雄激素受體(多肽抗原)土壤脫氫酶(SDHA)測試盒亞碲酸鈉肉湯培養(yǎng)基基礎(chǔ)
水解酶結(jié)構(gòu)域蛋白14B抗體5-羥色受體2A抗原土壤中性蛋白酶測試盒葡萄球菌增菌肉湯
水解酶結(jié)構(gòu)域蛋白15抗體凝血酶Ⅱ(凝血因子II)抗原土壤堿性蛋白酶葡萄球菌選擇性瓊脂
肺α/β水解酶蛋白3抗體5-羥色受體3抗原FDA水解酶試劑盒北沙參亞碲酸鈉胨水培養(yǎng)基基礎(chǔ)
三磷酸腺苷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運蛋白F亞基3抗體5-羥色受體4抗原土壤酸性蛋白酶試劑盒葡萄球菌選擇性瓊脂110(CHAPMAN 瓊脂)
三磷酸腺苷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運蛋白A亞基5抗體粘蛋白-2/上皮膜抗原2抗原植物脫氫酶(SDHA)測試盒甘露卵黃培養(yǎng)基基礎(chǔ)
QGY7701細(xì)胞小鼠白介素1常春藤皂苷元(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat
人胰島抗體常春藤皂苷元-28-O-β-D-葡萄糖酯苷Human, Mouse
大鼠巨噬集落激因子常山(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat
大鼠巨噬來源的趨化因子巢脾(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse
人抗唾液腺導(dǎo)管組織抗體朝藿定A(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat
小鼠白介素1β朝藿定A1(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat
人抗紡錘體抗體朝藿定C(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat
大鼠巨噬炎性蛋白2車前草(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat
小鼠肌紅蛋白車前草(車前)(標(biāo)準(zhǔn)品)Human
注意事項:
盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對于其檢測效果無顯著影響,但為取得良好的使用效果,3-6個月內(nèi)推薦4℃保存品率,并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融。
如果有細(xì)菌或真菌污染推進高水平,會嚴(yán)重影響檢測效果開展面對面。
染色后宜盡快檢測,時間過長可能會導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加不斷發展。
如果細(xì)胞收集過程中使用了胰酶便利性,需注意設(shè)法去除殘留的胰酶拓展應用。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC,導(dǎo)致染色失敗實事求是。
熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅自動化方案,在進(jìn)行熒光觀察時,盡量縮短觀察時間廣泛應用,同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存提升。
用于流式細(xì)胞儀檢測時,如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細(xì)胞情況,并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善,可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測核心技術,這樣通尘G色化?梢杂行p少假陽性的壞死細(xì)胞。
需自備PBS創新能力。
本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用至關重要,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品發展,不得存放于普通住宅內(nèi)改進措施。
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作效果。