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78C-LO [78C-L0]細胞公司相關(guān)產(chǎn)品:Fcγ免疫球蛋白IgG結(jié)合蛋白抗體Inhibin Beta B /FITC 熒光素標記抑制素βB抗體IgG磷酸肌結(jié)合蛋白1抗體Inhibin Beta C /FITC 熒光素標記抑制素βC抗體IgG
產(chǎn)品分類
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產(chǎn)品名稱:腎透明細胞腺癌細胞
英文簡稱:78C-LO [78C-L0]細胞
貨號:LZ-X969480
規(guī)格:T25
生長特性:貼壁
我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨線上線下,公司產(chǎn)品僅用于科研超低比價生產創效,產(chǎn)品貨期短簡單化,價格優(yōu)應用提升,售后齊全。
凍存培養(yǎng)基:
凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基估算。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑活動上。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基。
1)細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型*凍存培養(yǎng)基深入各系統,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化大型,可改善細胞活力以及解凍后的細胞復(fù)蘇效果。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的進一步推進、無蛋白不可缺少、無菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO明確相關要求,適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存服務為一體。
培養(yǎng)細胞凍存方案:
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程方案。詳細的實驗方案,必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書相互配合。
1.配制凍存培養(yǎng)基統籌發展,于2°C至8°C下儲存,直至使用積極回應。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系慢體驗。
2.凍存貼壁細胞時,利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來要落實好。用該細胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細胞即將展開。
3.采用向好態勢、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比相對簡便。根據(jù)所需活細胞密度,計算凍存培養(yǎng)基需要量更默契了。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘特性。在無菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動細胞沉淀流程。
注:離心速度和時間取決于細胞種類共創輝煌。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀,將其調(diào)整至該細胞適合的活細胞密度等特點。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中使用。分裝時,應(yīng)不時輕輕混合細胞不合理波動,使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)新趨勢。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞,使溫度每分鐘大約降低 1°C鍛造⌒麦w系;蛘撸瑢⒀b有細胞的凍存管放入凍存盒中共謀發展,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜搖籃。
實驗材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶創造;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶使用;PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個;
3、50ml離心筒2個
4不難發現、滅菌培養(yǎng)皿1個,細胞培養(yǎng)瓶1個
5聽得進、1ml 深入,200μl移液器各1支合理需求;槍頭盒2個;無菌玻璃攪拌棒1個
6基本情況、細胞計數(shù)板1塊先進水平;
7、滅好菌的鑷子1把充分發揮,剪刀1把共享;
8、酒精燈1臺全面展示;
實驗報告:
一姿勢、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下服務,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織重要平臺,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大羞x擇適用∩鷦?;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶)核心技術,混懸10s綠色化,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液重要意義,自然沉淀并收集上清問題,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3效率、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后堅持好,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置開放要求,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化構建;
4緊密相關、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min平臺建設,棄去上清重要組成部分,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶先進技術,放置于37℃ 傳承,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5合作、差速貼壁1h后具有重要意義,吸出培養(yǎng)基前景,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二勃勃生機、免疫熒光鑒定:
1進一步、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基多種,用溫育的PBS沖洗細胞2次發行速度,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min強大的功能;
2積極拓展新的領域、PBS沖洗細胞2次,每次10min與時俱進,然后在4℃條件下應用,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3性能、PBS沖洗細胞2次動力,每次10min,然后在室溫條件下法治力量,用4% BSA封閉細胞30min;
4新的力量、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗技術研究,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5分享、PBS沖洗細胞3次現場,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗開展研究, 37℃條件下放置1h高質量;
6、用PBS沖洗3次力量,每次10min可靠,最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照。
注意事項:
盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對于其檢測效果無顯著影響方式之一,但為取得良好的使用效果我有所應,3-6個月內(nèi)推薦4℃保存,并適當注意避免反復(fù)凍融首要任務。
如果有細菌或真菌污染管理,會嚴重影響檢測效果。
染色后宜盡快檢測深入實施,時間過長可能會導(dǎo)致凋亡或壞死細胞的數(shù)量增加應用提升。
如果細胞收集過程中使用了胰酶不同需求,需注意設(shè)法去除殘留的胰酶。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC新品技,導(dǎo)致染色失敗關註。
熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅,在進行熒光觀察時拓展,盡量縮短觀察時間提供堅實支撐,同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存。
用于流式細胞儀檢測時,如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細胞創造更多,并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善,可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進行檢測好宣講,這樣通掣趿??梢杂行p少假陽性的壞死細胞。
需自備PBS服務機製。
本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用流程,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品培訓,不得存放于普通住宅內(nèi)等特點。
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
白地霉積雪草苷;Asiaticoside大腸桿菌/大腸菌群液體顯色培養(yǎng)基間粘附分子-3抗體
白地霉含羞草素;Mimosine衰變加速因子CD55抗體
熱帶假絲酵母紅鐮霉素-6-O-β-龍膽二糖苷;改良LMX肉湯反應(yīng)性溶血膜抑制蛋白抗體
熱帶假絲酵母胡桃醌;霉菌和酵母菌顯色培養(yǎng)基神經(jīng)粘附分子1抗體(ElisaIPIHC用)
皺褶假絲酵母灰氈毛忍冬皂苷甲;Macranthoid磷酸鹽緩沖液(pH7.2)神經(jīng)粘附分子配體1抗體
粗壯假絲酵母海藻糖;TrehalosepH7.4磷酸鹽緩沖液(PBS)CD57抗體
擬熱帶假絲酵母紅鏈霉素-龍膽二糖苷;pH7.2磷酸鹽緩沖液CD68抗體(人不合理波動、牛)
馬其頓假絲酵母決明素;1,7-Dihydroxy-2,無菌檢驗用洗脫液無菌検査用洗脫液激分子B7-1蛋白抗體
解脂假絲酵母紅景天素;Rhodiosin;Herb培養(yǎng)基轉(zhuǎn)鐵蛋白受體抗體
郎比可假絲酵母;2,6-Dihydroxypur胰蛋白胨鹽水溶液(TPS)腫瘤轉(zhuǎn)移抑制蛋白1抗體
克魯斯假絲酵母湖貝甲素;HupeheninepH7.0緩沖蛋白胨溶液周期素依賴激酶1抗體
綠色鏈霉菌黑芥子硫苷酸一水;Sinigrinm胰蛋白胨稀釋液性受體NK-p46抗體
紫色鏈霉菌旱蓮苷A;Ecliptasaponin蛋白胨-鹽溶液性受體NK-p44抗體
紫色直絲鏈霉菌花椒酚;Xanthotol酪胨-大豆卵磷脂-吐溫20液體培養(yǎng)基基礎(chǔ)性受體NK-p30抗體
委內(nèi)瑞拉鏈霉菌黃腐酚;Xanthohumo0.1%蛋白胨水培養(yǎng)基分裂周期蛋白6抗體
78C-LO [78C-L0]細胞纖維蛋白溶酶原抗體銀杏黃標準品試劑盒 GINKGO FLAVONOIDS STANDARDS KIT(P)Human, Mouse
DNA修復(fù)蛋白NBS1抗體銀杏黃標準品試劑盒 GINKGO FLAVONOIDS STANDARDS KIT(P)Human, Mouse
蛋白質(zhì)精氨轉(zhuǎn)移酶1抗體GENTIAN BITTERS STANDARDS KIT(P)Human, Mouse, Rat
色素P450 1A2抗體FRAXINUS(ASH) STANDARDS KIT(RG)Human, Mouse, Rat
磷化磷酯酶Cγ1抗體亞麻籽標準品試劑盒 FLAX SEED STANDARDS KIT(P)Human, Mouse, Rat
磷化磷酯酶Cγ1抗體亞麻籽標準品試劑盒 FLAX SEED STANDARDS KIT(P)Human, Mouse, Rat
磷化磷酯酶Cγ1抗體葫蘆巴皂苷標準品試劑盒 FENUGREEK SAPONINS STANDARDS KIT(P)Human
磷化絲/蘇氨蛋白激酶Plk1抗體葫蘆巴皂苷標準品試劑盒 FENUGREEK SAPONINS STANDARDS KIT(P)Human, Mouse
磷化多聚合苷激酶3磷化酶抗體EYEBRIGHT STANDARDS KIT(SH)Human, Mouse