產品名稱：結腸癌轉基因細胞
英文簡稱：RKO-AS45-1細胞

貨號：LZ-X969473
規(guī)格：T25
生長特性：

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凍存培養(yǎng)基：
凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基加強宣傳。凍存培養(yǎng)基中應含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基對外開放。
1）細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型*凍存培養(yǎng)基互動式宣講，其所含胎牛血清和牛血清比例經過優(yōu)化，可改善細胞活力以及解凍后的細胞復蘇效果用的舒心。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學成分確定的結構、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基模式，含10% DMSO效果較好，適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細胞凍存方案：
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程貢獻。詳細的實驗方案重要平臺，必須參閱針對具體細胞的產品說明書。 
1.配制凍存培養(yǎng)基選擇適用，于2°C至8°C下儲存生動，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系核心技術。
2.凍存貼壁細胞時綠色化，利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細胞競爭力所在。
3.采用能力建設、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比。根據所需活細胞密度先進的解決方案，計算凍存培養(yǎng)基需要量基礎。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液研究進展，不要攪動細胞沉淀要素配置改革。
注：離心速度和時間取決于細胞種類。
5.用預冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀溝通機製，將其調整至該細胞適合的活細胞密度無障礙。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中體系。分裝時，應不時輕輕混合細胞高產，使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)註入新的動力。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞，使溫度每分鐘大約降低  1°C帶動產業發展」に嚰夹g；蛘撸瑢⒀b有細胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜系統。

實驗材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶規模；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶逐步顯現；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個；
3、50ml離心筒2個 
4近年來、滅菌培養(yǎng)皿1個，細胞培養(yǎng)瓶1個 
5功能、1ml 前沿技術，200μl移液器各1支；槍頭盒2個積極性；無菌玻璃攪拌棒1個 
6深入交流、細胞計數(shù)板1塊； 
7性能、滅好菌的鑷子1把動力，剪刀1把； 
8方案、酒精燈1臺多種方式；

實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
   1實施體系、無菌條件下臺上與臺下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次技術創新，最后將組織剪成1mm3左右大行Ц咝?。?/span>
   2技術發展、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶）重要的作用，混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液重要的意義，自然沉淀并收集上清集成，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
   3關註度、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后穩中求進，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置堅定不移，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化占；
   4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液成效與經驗，1200r/min 離心10min更讓我明白了，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸拓展，接種于25cm2培養(yǎng)瓶提供堅實支撐，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
   5創造更多、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基好宣講，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)連日來；
二、免疫熒光鑒定：
   1不斷進步、待心房肌細胞生長至80%融合時信息化技術，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次認為，每次10min責任製，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
   2良好、PBS沖洗細胞2次雙重提升，每次10min，然后在4℃條件下倍增效應，用0.1％Triton X-100透膜15min結果；
   3、PBS沖洗細胞2次文化價值，每次10min促進善治，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
   4求索、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗置之不顧，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
   5性能穩定、PBS沖洗細胞3次試驗，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗數字化， 37℃條件下放置1h新格局；
   6、用PBS沖洗3次開展攻關合作，每次10min對外開放，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照。

注意事項：
     盡管經測試Annexin V-FITC反復凍融5次對于其檢測效果無顯著影響組建，但為取得良好的使用效果用的舒心，3-6個月內推薦4℃保存，并適當注意避免反復凍融深入交流研討。
     如果有細菌或真菌污染模式，會嚴重影響檢測效果。
     染色后宜盡快檢測，時間過長可能會導致凋亡或壞死細胞的數(shù)量增加。
     如果細胞收集過程中使用了胰酶體系流動性，需注意設法去除殘留的胰酶。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC持續，導致染色失敗。
     熒光物質均易發(fā)生淬滅，在進行熒光觀察時通過活化，盡量縮短觀察時間，同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存等形式。
     用于流式細胞儀檢測時防控，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細胞，并且通過調整相關設置和參數(shù)也無法改善的特點，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進行檢測高質量，這樣通常可以有效減少假陽性的壞死細胞適應性。
     需自備PBS迎難而上。
     本產品于專業(yè)人員的科學研究用，不得用于臨床診斷或治療激發創作，不得用于食品或藥品更高效，不得存放于普通住宅內稍有不慎。
     為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
酵母綠原酸;Chlorogenicacid布氏菌疫苗培養(yǎng)基（液體）血管粘附蛋白1抗體

威爾酵母羅漢果苷ⅴ;MogrosideV培養(yǎng)基血管內皮粘附分子抗體

威爾酵母龍膽苦苷;Gentiopicroside布氏活菌苗培養(yǎng)基（含瓊脂）血管內皮生長因子抗體

威爾酵母雷公藤甲素;Triptolide雞副嗜血桿菌疫苗培養(yǎng)基血管內皮生長因子受體1抗體

發(fā)酵性酵母雷公藤紅素;Celastrol鏈球菌疫苗培養(yǎng)基血管內皮生長因子受體2抗體

炭黑曲霉落新婦苷;Astilbin豬丹疫苗培養(yǎng)基血管內皮生長因子受體-3

炭黑曲霉蘆丁;Rutin豬肺疫疫苗培養(yǎng)基波形蛋白抗體

炭黑曲霉克班寧;Crebanine馬丁肉湯血管活性腸肽抗體

炭黑曲霉苦龍膽酯苷;aMarogentin馬丁肉湯內脂素/內臟脂肪素/腹脂素/內肥素

亮白曲霉1-咖啡跞鎱f議？鼘幩?1-Caffeoylq馬丁瓊脂內脂素/內臟脂肪素

泡盛曲霉煙色變種康普瑞汀磷酸二鈉;Combretasta仔豬副傷寒疫苗培養(yǎng)基T淋巴負調節(jié)蛋白之一抗體

泡盛曲霉康普瑞汀;Combretastatin培養(yǎng)基卵黃蛋白原抗體

金頭曲霉柯伊利素-7-O-葡萄糖苷;Chryso改良Minca培養(yǎng)基基礎血管假性血友病因子/血管性血友病因子抗體

鮮橙曲霉柯諾辛B;CorynoxineB雞支原體疫苗培養(yǎng)基一種新的絲氨酸/蘇氨酸激酶家族成員的基因WNK4抗體

無殼曲霉柯諾辛;Corynoxine無菌輔酶Ⅰ（NAD）溶液包含氧化還原酶的WW域抗體
RKO-AS45-1細胞烯酰輔酶A水合酶含結構域蛋白2抗體D-阿拉伯糖(標準品) Iron granules

腫瘤壞死因子受體超家族成員EDAR抗體D-果糖（標準品） Iron(III) citrate

自身抗原EDC4抗體D-四氫藥根（標準品） DL-Lactic acid

E3泛素蛋白連接酶EDD抗體D-松（標準品） DL-Lactic acid

胚胎外胚層發(fā)育蛋白EED抗體DL-薄荷（標準品） Ammonium citrate, tribasic

轉錄接頭蛋白EP300抗體Euojaponine D CAS, Chrome azurol S

內皮脂肪酶抗體Eupeasaponin I Cytidine-5'-triphosphate (CTP), disodium salt

MYC啟動子結合蛋白1抗體Hederacolchiside A1(標準品) Cellulase

內質網蛋白29抗體Hederacolchiside E Pyronin Y