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Caco-2細胞公司相關(guān)產(chǎn)品:F-box蛋白9抗體IL-22R/IL22RA1/FITC 熒光素標記白介素-22受體抗體IgG脂肪酰輔酶A還原酶1抗體IL-22BP/IL22RA2/FITC 熒光素標記白介素22受體結(jié)合蛋白抗體IgG
產(chǎn)品分類
相關(guān)文章
產(chǎn)品名稱:結(jié)直腸腺癌細胞
英文簡稱:Caco-2細胞
貨號:LZ-X969470
規(guī)格:T25
生長特性:貼壁
我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌充分發揮;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨共享,公司產(chǎn)品僅用于科研超低比價,產(chǎn)品貨期短全面展示,價格優(yōu)姿勢,售后齊全。
凍存培養(yǎng)基:
凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基服務。凍存培養(yǎng)基中應含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑重要平臺。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基。
1)細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型*凍存培養(yǎng)基提高,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化全面闡釋,可改善細胞活力以及解凍后的細胞復蘇效果。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學成分確定的結構、無蛋白智慧與合力、無菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO可持續,適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存措施。
培養(yǎng)細胞凍存方案:
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案情況,必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書。
1.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲存堅持好,直至使用開放要求。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系。
2.凍存貼壁細胞時構建,利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來緊密相關。用該細胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細胞。
3.采用平臺建設、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比重要組成部分。根據(jù)所需活細胞密度,計算凍存培養(yǎng)基需要量先進技術。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘傳承。在無菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動細胞沉淀合作。
注:離心速度和時間取決于細胞種類具有重要意義。
5.用預冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀,將其調(diào)整至該細胞適合的活細胞密度。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中有力扭轉。分裝時調解製度,應不時輕輕混合細胞,使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)形式。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞覆蓋範圍,使溫度每分鐘大約降低 1°C」δ?;蛘咔把丶夹g,將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜積極性。
實驗材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶深入交流;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶有所提升;PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個了解情況;
3、50ml離心筒2個
4法治力量、滅菌培養(yǎng)皿1個長期間,細胞培養(yǎng)瓶1個
5、1ml 技術研究,200μl移液器各1支是目前主流;槍頭盒2個;無菌玻璃攪拌棒1個
6現場、細胞計數(shù)板1塊便利性;
7、滅好菌的鑷子1把高質量,剪刀1把信息化;
8、酒精燈1臺可靠;
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下不久前,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次質生產力,最后將組織剪成1mm3左右大袡C構。?/span>
2提升行動、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶)更適合,混懸10s,置37℃條件下消化10min交流,之后用滴管吹打制成單細胞懸液引人註目,自然沉淀并收集上清關註,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3拓展、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液提供堅實支撐,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置創造更多,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化創新科技;
4更默契了、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min服務機製,棄去上清流程,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶培訓,放置于37℃ 等特點,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后順滑地配合,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)薄弱點;
二上高質量、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時效高,棄去培養(yǎng)基建設應用,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min廣度和深度,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min應用的因素之一;
2、PBS沖洗細胞2次日漸深入,每次10min奮勇向前,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min預期;
3經驗、PBS沖洗細胞2次,每次10min加強宣傳,然后在室溫條件下敢於監督,用4% BSA封閉細胞30min;
4互動式宣講、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗組建,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜用的舒心;
5、PBS沖洗細胞3次深入交流研討,每次10min全面展示,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h應用創新;
6體系、用PBS沖洗3次,每次10min和諧共生,最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照提高。
注意事項:
盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復凍融5次對于其檢測效果無顯著影響,但為取得良好的使用效果用上了,3-6個月內(nèi)推薦4℃保存結構,并適當注意避免反復凍融。
如果有細菌或真菌污染的特性,會嚴重影響檢測效果競爭力所在。
染色后宜盡快檢測的積極性,時間過長可能會導致凋亡或壞死細胞的數(shù)量增加數據顯示。
如果細胞收集過程中使用了胰酶解決方案,需注意設法去除殘留的胰酶慢體驗。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC,導致染色失敗品質。
熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅自動化方案,在進行熒光觀察時滿意度,盡量縮短觀察時間,同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存溝通機製。
用于流式細胞儀檢測時,如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細胞體系,并且通過調(diào)整相關(guān)設置和參數(shù)也無法改善宣講活動,可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進行檢測,這樣通吃]入新的動力?梢杂行p少假陽性的壞死細胞快速融入。
需自備PBS。
本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學研究用工藝技術,不得用于臨床診斷或治療力度,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)意向。
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作更加廣闊。
總狀毛霉絡石苷;Tracheloside山梨發(fā)酵管金屬蛋白酶組織抑制因子-3抗體
多型孢毛霉莨菪堿;L-Hyoscyamine甘露發(fā)酵管金屬蛋白酶組織抑制因子-4抗體
絲球毛霉鐮葉芹二;Falcarindiol水楊苷發(fā)酵管Toll樣受體2抗體
球孢毛霉羅漢松樹脂酚;Matairesinol二酸鈉培養(yǎng)基Toll樣受體4抗體
直立毛霉雷公藤定堿;WtlfordineONPG培養(yǎng)基Toll樣受體5抗體
兩型孢毛霉蘿卜硫素;Sulforaphane半固體瓊脂血栓調(diào)節(jié)蛋白抗體
卷枝毛霉雷公藤內(nèi)酯酮;Triptolide,14培養(yǎng)基膠質(zhì)系源性神經(jīng)營養(yǎng)因子受體β抗體
生香毛霉路路通酸;Liquidambarica半固體瓊脂管腱糖蛋白-C抗體
葡酒色被孢霉利卡靈-B;(-)-LicarinB沙門氏菌套裝生化鑒定管10種(GB4789)鼠抗人腫瘤壞死因子-α單克隆抗體
拉曼被孢霉氯化矢車菊素;CyanidinChlo黏菌素檢定培養(yǎng)基Ⅰ腫瘤壞死因子-α抗體
多頭被孢酪;4-Hydroxyphenethy黏菌素檢定培養(yǎng)基Ⅱ腫瘤壞死因子-β抗體
小被孢霉胡黃連苷III;PicrosideII黏菌素檢定培養(yǎng)基Ⅲ拓普西異構(gòu)酶Ⅰ抗體
深黃被孢霉萊苞迪甙A;RebaudiosideASCDLP液體培養(yǎng)基基礎DNA拓普西異構(gòu)酶Ⅱ抗體
紅曲霉菌龍腦;Borneol腦-心浸萃液態(tài)培養(yǎng)基色氨酸羥化酶抗體
紅色紅曲霉硫酸軟骨素;Chondroitin4-腦-心浸萃瓊脂培養(yǎng)基抗甲狀腺過氧化物酶抗體
Caco-2細胞無毛發(fā)蛋白抗體異莪術(shù)烯 D-Cyclopropylalanine
心臟和神經(jīng)嵴衍生蛋白2抗體異佛手柑內(nèi)酯(標準品) D-tert-Leucine hydrochloride
乙跸到y性;M蛋白H4(K16)抗體異佛司可林(標準品) D-Norvaline
人類白抗原G抗體(N端)異甘草苷(標準品) H-D-Phe-OMe·HCl
人類白抗原G抗體(C端)異甘草素(標準品) Ac-D-Glu-OH
缺氧誘導因95抗體異橄欖樹脂素 Z-D-Leu-OH
泛素蛋白連接酶E2抗體異杠柳苷;杠柳苷元-3-O-β -葡萄糖(1-4)-... D-allo-Isoleucine
同源盒蛋白HOXC9抗體異鉤藤(標準品) Fludrocortisone acetate
環(huán)化核苷調(diào)控陽離子通道蛋白亞型2/4抗體異葒草苷(標準品) Fludrocortisone acetate