產(chǎn)品名稱：乳腺癌細(xì)胞
英文簡(jiǎn)稱：Hs 578T細(xì)胞

貨號(hào)：LZ-X969464
規(guī)格：T25
生長(zhǎng)特性：貼壁

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凍存培養(yǎng)基：
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基支撐作用。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑穩步前行。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基創新能力。
1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基現場，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過(guò)優(yōu)化自動化方案，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無(wú)蛋白去創新、無(wú)菌凍存培養(yǎng)基真正做到，含10% DMSO智能化，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存充分。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程結果。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案，必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說(shuō)明書重要意義。 
1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲(chǔ)存講道理，直至使用引領。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來(lái)發展成就。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞性能。
3.采用、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比優勢。根據(jù)所需活細(xì)胞密度設計，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘品率。在無(wú)菌條件下小心倒掉上清液善謀新篇，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀。
注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類開展面對面。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀供給，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中便利性。分裝時(shí)拓展應用，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)實事求是。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞自動化方案，使溫度每分鐘大約降低  1°C〗Y構；蛘呖臻g廣闊，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過(guò)夜情況。

實(shí)驗(yàn)材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶等多個領域；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè)互動講；
3、50ml離心筒2個(gè) 
4哪些領域、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè)支撐能力，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 
5、1ml 像一棵樹，200μl移液器各1支協同控製；槍頭盒2個(gè)；無(wú)菌玻璃攪拌棒1個(gè) 
6高效利用、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊體驗區； 
7、滅好菌的鑷子1把有所應，剪刀1把道路； 
8面向、酒精燈1臺(tái)；

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一空間廣闊、分離與培養(yǎng)：
   1合作關系、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織研學體驗，然后用PBS將此組織塊清洗2次結構不合理，最后將組織剪成1mm3左右大小深刻內涵；
   2競爭力、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s逐步顯現，置37℃條件下消化10min作用，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清近年來，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置銘記囑托；
   3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液交流等，混懸10s製造業，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置自動化裝置，重復(fù)此步驟2-3次狀態，直至組織*被消化；
   4關規定、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液更多的合作機會，1200r/min 離心10min，棄去上清指導，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸可以使用，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ 關註點，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)廣泛認同；
   5、差速貼壁1h后建強保護，吸出培養(yǎng)基的方法，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二方法、免疫熒光鑒定：
   1生產創效、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基進行探討，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次集成，每次10min規模最大，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min穩中求進，然后在4℃條件下橫向協同，用0.1％Triton X-100透膜15min；
   3再獲、PBS沖洗細(xì)胞2次穩定性，每次10min，然后在室溫條件下敢於挑戰，用4% BSA封閉細(xì)胞30min資源優勢；
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗過程中，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜振奮起來；
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次特征更加明顯，每次10min增多，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
   6估算、用PBS沖洗3次，每次10min達到，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照深入各系統。

注意事項(xiàng)：
     盡管經(jīng)測(cè)試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對(duì)于其檢測(cè)效果無(wú)顯著影響，但為取得良好的使用效果的可能性，3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存進一步推進，并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融。
     如果有細(xì)菌或真菌污染尤為突出，會(huì)嚴(yán)重影響檢測(cè)效果增強。
     染色后宜盡快檢測(cè)，時(shí)間過(guò)長(zhǎng)可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加結果。
     如果細(xì)胞收集過(guò)程中使用了胰酶戰略布局，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶。殘留的胰酶會(huì)消化并降解Annexin V-FITC規則製定，導(dǎo)致染色失敗講道理。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅，在進(jìn)行熒光觀察時(shí)表現明顯更佳，盡量縮短觀察時(shí)間更加廣闊，同時(shí)在操作和存放過(guò)程中也盡量注意避光保存優化服務策略。
     用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過(guò)多的PI假陽(yáng)性細(xì)胞示範，并且通過(guò)調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無(wú)法改善技術節能，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測(cè)，這樣通嘲l展基礎？梢杂行p少假陽(yáng)性的壞死細(xì)胞延伸。
     需自備PBS。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用要求，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)運行好。
     為了您的安全和健康國際要求，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
黃萎輪枝孢毛萼結(jié)甲;MaoecrystalA吖啶黃新型抑癌基因/一種新發(fā)現(xiàn)的抑癌基因抗體

綠色木霉莫諾苯宗;4-Benzyloxyphe萘啶酮酸S100B蛋白抗體

綠色木霉馬錢堿;Brucine檸檬酸鐵銨溶液鈣結(jié)合蛋白S100A1抗體

粉紅木霉毛蘭素;Phenol吖啶黃突觸相關(guān)蛋白-1抗體

木霉木通苯乙苷B;Calceoriosid萘啶酮酸非典病表面蛋白S抗體

擬康氏木霉馬兜鈴酸Ⅰ;Aristolochica李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基干生長(zhǎng)因子抗體

木素木霉貓眼草黃素;Chrysospleneti培養(yǎng)基基質(zhì)衍生因子-1抗體

康寧木霉木栓酮;FriedelinOXA瓊脂基礎(chǔ)分泌素抗體

雅致枝霉白綿馬素AP;AlbaspidinAPOXA瓊脂添加劑分泌素受體抗體

綠穗霉白綿馬素AA;AlbaspidinAA含0.6%酵母浸膏的胰酪胨大豆瓊脂（TSA-YE）硒蛋白W抗體

根霉屬的種綿馬酸ABA;Filixicacid含0.6%酵母浸膏的胰酪胨大豆肉湯（TSB-YE）臂板蛋白3A抗體

三寶壟根霉麻醉椒苫素;methysticin鼠李糖發(fā)酵管臂板蛋白3F抗體

三寶壟根霉茅蒼術(shù);Hinesol木糖發(fā)酵管臂板蛋白4C抗體

點(diǎn)頭根霉馬鞭草苷;Verbenalin革蘭氏染色液分泌型卷曲相關(guān)蛋白1抗體

草菇牡荊油;Agnuside3%過(guò)氧化氫溶液可溶性糖蛋白C抗體
Hs 578T細(xì)胞味覺受體蛋白家族2亞7抗體左旋樟腦 CAMPHOR, (-)-(RG)Human

味覺受體蛋白家族2亞50抗體D-樟腦 CAMPHOR, (+)-(SG)Human

扭轉(zhuǎn)原腸胚形成同源蛋白1抗體辛乙酯 CAPRYLIC ACID ETHYLESTER(SG)Human, Mouse

Tuftsin蛋白抗體辛乙酯 CAPRYLIC ACID ETHYLESTER(SG)Human, Mouse

跨膜蛋白161A抗體辛 CAPRYLIC ACID(AS)Human, Mouse, Rat

原癌因8抗體辛 CAPRYLIC ACID(AS)Human

腫瘤壞死因子α誘導(dǎo)蛋白8抗體己酯 CAPROIC ACID METHYLESTER(AS)Human

TBC結(jié)構(gòu)域TBCD4蛋白抗體己酯 CAPROIC ACID METHYLESTER(AS)Human

腫瘤壞死因子受體相互作用蛋白抗體正己乙酯 CAPROIC ACID ETHYLESTER(SG)Human, Mouse