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BT-474 BT474細(xì)胞

產(chǎn)品簡介

BT-474 [BT474]細(xì)胞公司相關(guān)產(chǎn)品:
FGFR1癌因伴侶蛋白2抗體IL-17(Interleukin-17)human/FITC 熒光素標(biāo)記白介素-17抗體(人)IgG
成纖維生長因子受體底物2抗體IL-17RC/IL-17RL/FITC 熒光素標(biāo)記白介素17受體C抗體IgG

更新時間:2021-08-30
訪問次數(shù):974
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產(chǎn)品名稱:乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞
英文簡稱:BT-474 [BT474]細(xì)胞

貨號:LZ-X969461
規(guī)格:T25
生長特性:貼壁

圖片2.jpg 

我司常期代理ATCC Acris  abcam  cst  Biorbyt  santa  Novus  sigma  lifespan  NEB  roche  ABI  R&D millipore   BD  Qiagen Cayman  Jackson Life  GeneTex   Bio-Rad DSHB  tocris   peprotech 等品牌高效化;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨更高效,公司產(chǎn)品僅用于科研超低比價姿勢,產(chǎn)品貨期短新產品,價格優(yōu),售后齊全供給。

凍存培養(yǎng)基:
凍存細(xì)胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基全過程。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基積極參與。
1)細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基優勢領先,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化,可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果探討。 
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的新技術、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基持續創新,含10% DMSO創造,適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案:
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程分析。詳細(xì)的實驗方案,必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。 
1.配制凍存培養(yǎng)基合規意識,于2°C至8°C下儲存聽得懂,直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系協調機製。
2.凍存貼壁細(xì)胞時設備製造,利用傳代時所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞重要作用。
3.采用高質量、細(xì)胞計數(shù)儀按照臺盼藍(lán)拒染法或者使用自動細(xì)胞計數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度很重要,計算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液保護好,不要攪動細(xì)胞沉淀能力和水平。
注:離心速度和時間取決于細(xì)胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀充足,將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度註入了新的力量。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時異常狀況,應(yīng)不時輕輕混合細(xì)胞說服力,使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞蓬勃發展,使溫度每分鐘大約降低  1°C作用≈匾饬x;蛘邌栴},將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中應用的選擇,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。

圖片2.jpg 

實驗材料: 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶逐漸顯現;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個重要性;
3著力增加、50ml離心筒2個 
4、滅菌培養(yǎng)皿1個系統穩定性,細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個 
5背景下、1ml ,200μl移液器各1支科技實力;槍頭盒2個開展試點;無菌玻璃攪拌棒1個 
6、細(xì)胞計數(shù)板1塊可靠保障; 
7規劃、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把機製; 
8各項要求、酒精燈1臺;

實驗報告:
一發力、分離與培養(yǎng):
   1優勢與挑戰、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織越來越重要的位置,然后用PBS將此組織塊清洗2次問題分析,最后將組織剪成1mm3左右大小投入力度;
   2效果、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s技術,置37℃條件下消化10min改善,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清結構重塑,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置推廣開來;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液貢獻法治,混懸10s密度增加,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次信息化,直至組織*被消化發展需要;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液全方位,1200r/min 離心10min信息,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸管理,接種于25cm2培養(yǎng)瓶廣泛關註,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5顯示、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基進展情況,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)重要的作用;
二、免疫熒光鑒定:
   1明確相關要求、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時服務為一體,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次特點,每次10min相互配合,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2品質、PBS沖洗細(xì)胞2次積極回應,每次10min,然后在4℃條件下深化涉外,用0.1%Triton X-100透膜15min全會精神;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次又進了一步,每次10min智能化,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min拓展基地;
   4綜合措施、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜處理;
   5攜手共進、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min自然條件,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗擴大公共數據, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次設計標準,每次10min深度,最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照。

注意事項:
     盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對于其檢測效果無顯著影響大部分,但為取得良好的使用效果重要工具,3-6個月內(nèi)推薦4℃保存將進一步,并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融更加堅強。
     如果有細(xì)菌或真菌污染,會嚴(yán)重影響檢測效果創造。
     染色后宜盡快檢測使用,時間過長可能會導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加。
     如果細(xì)胞收集過程中使用了胰酶,需注意設(shè)法去除殘留的胰酶不難發現。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC,導(dǎo)致染色失敗聽得懂。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅推動,在進(jìn)行熒光觀察時,盡量縮短觀察時間設備製造,同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存有效性。
     用于流式細(xì)胞儀檢測時,如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細(xì)胞資源配置,并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善形勢,可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測,這樣通硻C遇與挑戰?梢杂行p少假陽性的壞死細(xì)胞高效節能。
     需自備PBS。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用取得明顯成效,不得用于臨床診斷或治療基地,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)大力發展。
     為了您的安全和健康約定管轄,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
干酪乳桿菌干酪亞種尼泊金異丁酯;Isobutyl4-Hy三糖鐵(TSI)瓊脂P-糖蛋白

巴氏醋桿菌巴氏亞種牛膝甾酮;Lnokosterone培養(yǎng)基顆粒蛋白前體抗體

瑞士乳桿菌尿苷;Uridine三糖鐵(TSI)瓊脂斜面磷脂酰肌激酶抗體

乳鏈球菌尿嘧啶;Uracil賴氨酸脫羧酶試驗培養(yǎng)基孕激素誘導(dǎo)阻斷因子抗體

德氏乳桿菌保加利亞亞種鳥嘌呤;Guanine賴氨酸脫羧酶試驗piwi樣1蛋白抗體

醋酸菌L-鳥氨酸鹽酸鹽;L(+)-Ornith氨基酸脫羧酶試驗對照蛋白激酶A抗體

蘇云金芽孢桿菌鳥苷;Guanosine無菌液體石蠟蛋白激酶B

蘇云金芽孢桿菌尿素;UreaONPG培養(yǎng)基蛋白激酶C抗體

蘇云金芽孢桿菌尼奧林;Neoline提單產,Bullatin營養(yǎng)瓊脂(NA)尿激酶型纖溶酶原激活因子抗體

蘇云金芽孢桿菌藕诵募夹g;蛆Z去氧膽酸;Taurochenod營養(yǎng)瓊脂平板(NA)人胎盤生長因子相關(guān)抗體

蘇云金芽孢桿菌牛血清白蛋白;Bovinealbumi蛋白胨水(胰蛋白胨培養(yǎng)基)小鼠胎盤生長因子抗體

蘇云金芽孢桿菌耐斯糖;Nystose培養(yǎng)基胎盤生長因子抗體

發(fā)根土壤桿菌(發(fā)根植物單胞菌)尿囊素;AllantoinKovacs氏靛基質(zhì)試劑外周髓鞘蛋白-22

植物乳桿菌牛磺熊去氧膽酸;Tauroursodeo緩沖葡萄糖蛋白胨水平足蛋白抗體

蔥頭伯克氏菌牛蒡子苷元;ArctigeninV-P試劑“撲克蒙"蛋白又稱“波克曼"蛋白抗體
BT-474 [BT474]細(xì)胞維生素A抗體科羅索 COROSOLIC ACID(P)Human, Mouse, Rat

蛋白聚糖Versican抗體科羅索 COROSOLIC ACID(P)Human, Mouse, Rat

VWCE抗體可替寧 COTININE(RG)Human, Mouse, Rat

視神經(jīng)視網(wǎng)膜相關(guān)蛋白VAX1抗體2-鄰香豆 COUMARIC ACID, 2-(P)Human, Mouse, Rat

視神經(jīng)視網(wǎng)膜相關(guān)蛋白VAX2抗體2-鄰香豆 COUMARIC ACID, 2-(P)Human, Mouse

維生素D3受體抗體反-對香豆 COUMARIC ACID, TRANS-P-(P)Human, Mouse, Rat

B淋巴前體蛋白1抗體反-對香豆 COUMARIC ACID, TRANS-P-(P)Human, Mouse

血管內(nèi)皮粘附分子抗體芹菜素-7-葡萄糖苷 APIGENIN-7-O-GLUCOSIDE (COSMOSIIN)(P)Human

血管非炎性蛋白2抗體芹菜素-7-葡萄糖苷 APIGENIN-7-O-GLUCOSIDE (COSMOSIIN)(P)Human, Mouse


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