產(chǎn)品名稱：肝癌細(xì)胞實施體系；Li-7
英文簡稱：人肝癌細(xì)胞臺上與臺下；Li-7細(xì)胞

貨號：LZ-X969340
規(guī)格：T25
生長特性：貼壁生長　

我司常期代理ATCC Acris  abcam  cst  Biorbyt  santa  Novus  sigma  lifespan  NEB  roche  ABI  R&D millipore   BD  Qiagen Cayman  Jackson Life  GeneTex   Bio-Rad DSHB  tocris   peprotech 等品牌；部分產(chǎn)品現(xiàn)貨技術創新，公司產(chǎn)品僅用于科研超低比價效高性，產(chǎn)品貨期短，價格優(yōu)技術發展，售后齊全重要的作用。

凍存培養(yǎng)基：
凍存細(xì)胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基重要的意義。
1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基集成，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果關註度。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基穩中求進，含10% DMSO橫向協同，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程再獲。詳細(xì)的實驗方案穩定性，必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。 
1.配制凍存培養(yǎng)基敢於挑戰，于2°C至8°C下儲存資源優勢，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系過程中。
2.凍存貼壁細(xì)胞時堅實基礎，利用傳代時所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞大數據。
3.采用前景、細(xì)胞計數(shù)儀按照臺盼藍(lán)拒染法或者使用自動細(xì)胞計數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計算凍存培養(yǎng)基需要量保障性。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液信息化技術，不要攪動細(xì)胞沉淀領先水平。
注：離心速度和時間取決于細(xì)胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀責任製，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度效率。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時雙重提升，應(yīng)不時輕輕混合細(xì)胞增強，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞結果，使溫度每分鐘大約降低  1°C戰略布局。或者規則製定，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中講道理，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜引領。

實驗材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶更加廣闊；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶優化服務策略；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個；
3示範、50ml離心筒2個 
4規模、滅菌培養(yǎng)皿1個，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個 
5新格局、1ml 作用，200μl移液器各1支；槍頭盒2個特點；無菌玻璃攪拌棒1個 
6、細(xì)胞計數(shù)板1塊； 
7製度保障、滅好菌的鑷子1把聯動，剪刀1把； 
8顯示、酒精燈1臺技術特點；

實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
   1貢獻、無菌條件下廣泛應用，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次持續，最后將組織剪成1mm3左右大星闆r。?/span>
   2高品質、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶）等多個領域，混懸10s，置37℃條件下消化10min統籌，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液哪些領域，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置產品和服務；
   3像一棵樹、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s迎難而上，置37℃消化10 min后有效保障，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置激發創作，重復(fù)此步驟2-3次更高效，直至組織*被消化稍有不慎；
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min全面協議，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸堅持先行，接種于25cm2培養(yǎng)瓶講實踐，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)具體而言；
   5最為顯著、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基奮戰不懈，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)生產能力；
二、免疫熒光鑒定：
   1規定、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時可持續，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次銘記囑托，每次10min事關全面，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
   2製造業、PBS沖洗細(xì)胞2次發展目標奮鬥，每次10min，然后在4℃條件下狀態，用0.1％Triton X-100透膜15min不斷完善；
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次全面革新，每次10min勞動精神，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min方便；
   4明顯、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜基石之一；
   5基礎上、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min行業分類，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗預下達， 37℃條件下放置1h；
   6應用領域、用PBS沖洗3次創新為先，每次10min提高鍛煉，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照。

注意事項：
     盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對于其檢測效果無顯著影響行業內卷，但為取得良好的使用效果進行培訓，3-6個月內(nèi)推薦4℃保存，并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融凝聚力量。
     如果有細(xì)菌或真菌污染關鍵技術，會嚴(yán)重影響檢測效果。
     染色后宜盡快檢測，時間過長可能會導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加有所提升。
     如果細(xì)胞收集過程中使用了胰酶，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶最深厚的底氣。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC更讓我明白了，導(dǎo)致染色失敗。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅提供了有力支撐，在進(jìn)行熒光觀察時飛躍，盡量縮短觀察時間，同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存積極。
     用于流式細(xì)胞儀檢測時大數據，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細(xì)胞，并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善經驗，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測，這樣通常可以有效減少假陽性的壞死細(xì)胞進一步意見。
     需自備PBS重要部署。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療產業，不得用于食品或藥品數字技術，不得存放于普通住宅內(nèi)。
     為了您的安全和健康工具，請穿實驗服并戴一次性手套操作尤為突出。
球孢白僵菌拉丁屬名: Pedobacter bauzanensis

博岑土地桿菌拉丁屬名: Asterotremella humicola

土生星耳酵母拉丁屬名: Acinetobacter  pittii

皮特不動桿菌注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于類或動物的臨床診斷或治療市場開拓，非藥用標準，非食用

禾谷鐮孢注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于類或動物的臨床診斷或治療環境，非藥用主要抓手，非食用

鏈格孢拉丁屬名: jejuni

空腸彎曲桿菌拉丁屬名: Chaetomium funicola

繩生毛殼拉丁屬名: Nocardioides exalbidus

微白類諾卡氏菌拉丁屬名: Escherichia coli

大腸埃希氏菌拉丁屬名: Pseudomonas antarctica

南假單胞菌規(guī)格: 1ml

大腸埃希氏菌○抗原微量凝集定型血清診斷液 ○54拉丁屬名: Agaricus bisporus (Lange) Singer

雙孢蘑菇(白蘑菇、洋蘑菇)拉丁屬名: Streptomyces   nanhaiensis

鏈霉菌拉丁屬名: perfringens Type B

產(chǎn)氣莢膜梭菌 素B型拉丁屬名: Pelagibaca  zhangzhouensis

外海橄欖形菌拉丁屬名: Zygosaccharomyces mellis
人肝癌細(xì)胞重要的角色；Li-7細(xì)胞嗜粒趨化蛋白3抗體CD320分子(CD320)檢測試劑盒CD320 ELISA Kit

趨化素抗體CD30配體(CD30L)檢測試劑盒CD30L ELISA Kit

5號染色體開放閱讀框55抗體CD163分子(CD163)檢測試劑盒CD163 ELISA Kit

表面趨化因子受體7抗體CD14分子(CD14)檢測試劑盒CD14 ELISA Kit

色素c氧化酶7A2抗體CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白β(CEBPβ)檢測試劑盒CEBPβ ELISA Kit

CD36抗體C4結(jié)合蛋白α(C4BPα)檢測試劑盒C4BPα ELISA Kit

固合成酶CYP11B2抗體B-細(xì)胞淋巴瘤因子2(Bcl2)檢測試劑盒Bcl2 ELISA Kit

7號染色體開放閱讀框16抗體B-細(xì)胞激活因子受體(BAFFR)檢測試劑盒BAFFR ELISA Kit

10號染色體開放閱讀框62抗體B-細(xì)胞激活因子(BAFF)檢測試劑盒BAFF ELISA Kit