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人肝癌細胞引領作用;Li-7細胞公司相關產品:磷酸化抑癌蛋白EZH2抗體CCR-3(CC chemokine receptor 3) CC趨化因子受體3抗原AEG-1抗體CCR-2A(C-C Chemokine receptor 2A) 表面趨化因子受體2A抗原
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產品名稱:肝癌細胞;Li-7
英文簡稱:人肝癌細胞經驗;Li-7細胞
貨號:LZ-X969340
規(guī)格:T25
生長特性:貼壁生長
我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌;部分產品現貨,公司產品僅用于科研超低比價敢於監督,產品貨期短對外開放,價格優(yōu),售后齊全組建。
凍存培養(yǎng)基:
凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基用的舒心。凍存培養(yǎng)基中應含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基深入交流研討。
1)細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型*凍存培養(yǎng)基產能提升,其所含胎牛血清和牛血清比例經過優(yōu)化,可改善細胞活力以及解凍后的細胞復蘇效果品牌。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學成分確定的適應能力、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基節點,含10% DMSO快速增長,適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細胞凍存方案:
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案通過活化,必須參閱針對具體細胞的產品說明書。
1.配制凍存培養(yǎng)基的特性,于2°C至8°C下儲存競爭力所在,直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系高效。
2.凍存貼壁細胞時先進的解決方案,利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細胞領域。
3.采用研究進展、細胞計數儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數儀測定總細胞數和活細胞百分比。根據所需活細胞密度,計算凍存培養(yǎng)基需要量溝通機製。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液體系,不要攪動細胞沉淀宣講活動。
注:離心速度和時間取決于細胞種類高產。
5.用預冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀,將其調整至該細胞適合的活細胞密度快速融入。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中核心技術體系。分裝時,應不時輕輕混合細胞力度,使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)新產品。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞,使溫度每分鐘大約降低 1°C持續發展「訌V闊;蛘撸瑢⒀b有細胞的凍存管放入凍存盒中合作,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。
實驗材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶勇探新路;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶長遠所需;PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個;
3擴大、50ml離心筒2個
4非常完善、滅菌培養(yǎng)皿1個,細胞培養(yǎng)瓶1個
5讓人糾結、1ml 性能,200μl移液器各1支;槍頭盒2個不斷豐富;無菌玻璃攪拌棒1個
6方案、細胞計數板1塊;
7同時、滅好菌的鑷子1把實施體系,剪刀1把;
8幅度、酒精燈1臺技術創新;
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1創新的技術、無菌條件下設計能力,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織更合理,然后用PBS將此組織塊清洗2次有序推進,最后將組織剪成1mm3左右大小顯著;
2深入開展、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶)更優美,混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液更為一致,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置堅定不移;
3落地生根、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s技術的開發,置37℃消化10 min后成效與經驗,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次健康發展,直至組織*被消化提供了有力支撐;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液堅實基礎,1200r/min 離心10min積極,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸前景,接種于25cm2培養(yǎng)瓶好宣講,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)保障性;
5前來體驗、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基實現了超越,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)發揮重要帶動作用;
二、免疫熒光鑒定:
1確定性、待心房肌細胞生長至80%融合時明確了方向,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次意料之外,每次10min必然趨勢,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2橋梁作用、PBS沖洗細胞2次文化價值,每次10min,然后在4℃條件下講故事,用0.1%Triton X-100透膜15min單產提升;
3、PBS沖洗細胞2次置之不顧,每次10min多樣性,然后在室溫條件下性能穩定,用4% BSA封閉細胞30min;
4規模、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗數字化,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5作用、PBS沖洗細胞3次開展攻關合作,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h越來越重要;
6、用PBS沖洗3次優化上下,每次10min改革創新,最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照。
注意事項:
盡管經測試Annexin V-FITC反復凍融5次對于其檢測效果無顯著影響發揮,但為取得良好的使用效果品牌,3-6個月內推薦4℃保存,并適當注意避免反復凍融設施。
如果有細菌或真菌污染節點,會嚴重影響檢測效果。
染色后宜盡快檢測要求,時間過長可能會導致凋亡或壞死細胞的數量增加。
如果細胞收集過程中使用了胰酶,需注意設法去除殘留的胰酶開放以來。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC等形式,導致染色失敗。
熒光物質均易發(fā)生淬滅組合運用,在進行熒光觀察時的特點,盡量縮短觀察時間,同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存研究與應用。
用于流式細胞儀檢測時適應性,如果發(fā)現Annexin V-FITC單獨染色時出現了過多的PI假陽性細胞,并且通過調整相關設置和參數也無法改善有效保障,可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進行檢測激發創作,這樣通常可以有效減少假陽性的壞死細胞稍有不慎。
需自備PBS探索。
本產品于專業(yè)人員的科學研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品融合,不得存放于普通住宅內進一步完善。
為了您的安全和健康相結合,請穿實驗服并戴一次性手套操作提升。
球孢白僵菌拉丁屬名: Pedobacter bauzanensis
博岑土地桿菌拉丁屬名: Asterotremella humicola
土生星耳酵母拉丁屬名: Acinetobacter pittii
皮特不動桿菌注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動物的臨床診斷或治療相關性,非藥用競爭力,非食用
禾谷鐮孢注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動物的臨床診斷或治療的必然要求,非藥用的過程中,非食用
鏈格孢拉丁屬名: jejuni
空腸彎曲桿菌拉丁屬名: Chaetomium funicola
繩生毛殼拉丁屬名: Nocardioides exalbidus
微白類諾卡氏菌拉丁屬名: Escherichia coli
大腸埃希氏菌拉丁屬名: Pseudomonas antarctica
南假單胞菌規(guī)格: 1ml
大腸埃希氏菌○抗原微量凝集定型血清診斷液 ○54拉丁屬名: Agaricus bisporus (Lange) Singer
雙孢蘑菇(白蘑菇、洋蘑菇)拉丁屬名: Streptomyces nanhaiensis
鏈霉菌拉丁屬名: perfringens Type B
產氣莢膜梭菌 素B型拉丁屬名: Pelagibaca zhangzhouensis
外海橄欖形菌拉丁屬名: Zygosaccharomyces mellis
人肝癌細胞;Li-7細胞嗜粒趨化蛋白3抗體CD320分子(CD320)檢測試劑盒CD320 ELISA Kit
趨化素抗體CD30配體(CD30L)檢測試劑盒CD30L ELISA Kit
5號染色體開放閱讀框55抗體CD163分子(CD163)檢測試劑盒CD163 ELISA Kit
表面趨化因子受體7抗體CD14分子(CD14)檢測試劑盒CD14 ELISA Kit
色素c氧化酶7A2抗體CCAAT增強子結合蛋白β(CEBPβ)檢測試劑盒CEBPβ ELISA Kit
CD36抗體C4結合蛋白α(C4BPα)檢測試劑盒C4BPα ELISA Kit
固合成酶CYP11B2抗體B-細胞淋巴瘤因子2(Bcl2)檢測試劑盒Bcl2 ELISA Kit
7號染色體開放閱讀框16抗體B-細胞激活因子受體(BAFFR)檢測試劑盒BAFFR ELISA Kit
10號染色體開放閱讀框62抗體B-細胞激活因子(BAFF)檢測試劑盒BAFF ELISA Kit