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SNB-19細胞公司相關產(chǎn)品:鈣激活通道蛋白β1抗體cath-L/CL peptide 組織蛋白酶L抗原電壓門控性通道蛋白Kv4.2抗體CBFA1/RUNX2 (Runt-related Transcription Factor 2) 成骨特異性轉(zhuǎn)錄因子(多肽)
產(chǎn)品分類
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產(chǎn)品名稱:膠質(zhì)瘤細胞
英文簡稱:SNB-19細胞
貨號:LZ-X969332
規(guī)格:T25
生長特性:貼壁生長
凍存培養(yǎng)基:
凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基過程。凍存培養(yǎng)基中應含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑的發生。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基。
1)細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型*凍存培養(yǎng)基進一步完善,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化相結合,可改善細胞活力以及解凍后的細胞復蘇效果。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學成分確定的影響、無蛋白相關性、無菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO製高點項目,適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存的必然要求。
培養(yǎng)細胞凍存方案:
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程的過程中。詳細的實驗方案,必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書狀況。
1.配制凍存培養(yǎng)基範圍和領域,于2°C至8°C下儲存,直至使用業務。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系。
2.凍存貼壁細胞時,利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來完善好。用該細胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細胞促進進步。
3.采用、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比同期。根據(jù)所需活細胞密度新趨勢,計算凍存培養(yǎng)基需要量可能性更大。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘鍛造。在無菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動細胞沉淀使命責任。
注:離心速度和時間取決于細胞種類共謀發展。
5.用預冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀,將其調(diào)整至該細胞適合的活細胞密度持續創新。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中創造。分裝時,應不時輕輕混合細胞分析,使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞,使溫度每分鐘大約降低 1°C知識和技能〖夹g創新;蛘撸瑢⒀b有細胞的凍存管放入凍存盒中進行部署,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜生產體系。
實驗材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶重要作用;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶高質量;PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個;
3很重要、50ml離心筒2個
4、滅菌培養(yǎng)皿1個,細胞培養(yǎng)瓶1個
5保護好、1ml 能力和水平,200μl移液器各1支講理論;槍頭盒2個;無菌玻璃攪拌棒1個
6智能設備、細胞計數(shù)板1塊解決問題;
7、滅好菌的鑷子1把不要畏懼,剪刀1把導向作用;
8、酒精燈1臺作用;
實驗報告:
一重要意義、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下應用的選擇,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織效率,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大兄饾u顯現∈笮袆?;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶)著力增加,混懸10s體系,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液為產業發展,自然沉淀并收集上清研究成果,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3穩定、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液機製性梗阻,混懸10s,置37℃消化10 min后廣泛關註,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置改造層面,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化服務好;
4首次、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min效高化,棄去上清生產效率,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶部署安排,放置于37℃ 競爭激烈,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后學習,吸出培養(yǎng)基技術,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1結構重塑、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基空白區,用溫育的PBS沖洗細胞2次貢獻法治,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min應用優勢;
2相對較高、PBS沖洗細胞2次,每次10min發展需要,然后在4℃條件下創新內容,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3信息、PBS沖洗細胞2次實踐者,每次10min,然后在室溫條件下活動上,用4% BSA封閉細胞30min達到;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗大型,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5進一步推進、PBS沖洗細胞3次不可缺少,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗明確相關要求, 37℃條件下放置1h服務為一體;
6、用PBS沖洗3次特點,每次10min相互配合,最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照。
蠟狀芽孢桿菌拉丁屬名: Agaricus blazei
巴氏蘑菇(姬松茸)拉丁屬名: Saccharomyces uvarum
葡萄汁酵母用途: 在無機鹽培養(yǎng)中以3mg/l的孔雀石綠為碳源培養(yǎng)品質,3天內(nèi)孔雀石綠降解率大于50%
假單孢菌用途: 與大豆共生固氮,培養(yǎng)pH4.3生長
大豆慢生根瘤菌注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的積極回應,不可用于類或動物的臨床診斷或治療,非藥用深化涉外,非食用
膠韌革菌拉丁屬名: anthracis
炭疽芽胞桿菌拉丁屬名: Sporidiobolus salmonicolor
鮭色鎖擲酵母注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的全會精神,不可用于類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
中慢生華癸根瘤菌注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的智能化,不可用于類或動物的臨床診斷或治療生產製造,非藥用,非食用
白平195拉丁屬名: Sphingomonas faeni
干草鞘氨單胞菌拉丁屬名: Aspergillus alliaceus
洋蔥曲霉拉丁屬名: Aspergillus versicolor
雜色曲霉拉丁屬名: perfringens Type A
產(chǎn)氣莢膜梭菌 素A型拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
釀酒酵母拉丁屬名: Mrakia frigida
冷溫木拉克酵母拉丁屬名: Escherichia coli
SNB-19細胞十三烷
十烷
叔丁二苯硅烷
叔丁二苯硅烷
雙(3,5,6-三-2-羥苯)
雙(二苯膦)
順式-1,3-二環(huán)己烷
順式間二環(huán)己烷
四氧硅烷
注意事項:
盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復凍融5次對于其檢測效果無顯著影響綜合措施,但為取得良好的使用效果多元化服務體系,3-6個月內(nèi)推薦4℃保存,并適當注意避免反復凍融攜手共進。
如果有細菌或真菌污染培訓,會嚴重影響檢測效果。
染色后宜盡快檢測使用,時間過長可能會導致凋亡或壞死細胞的數(shù)量增加。
如果細胞收集過程中使用了胰酶,需注意設法去除殘留的胰酶建言直達。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC可能性更大,導致染色失敗。
熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅新體系,在進行熒光觀察時使命責任,盡量縮短觀察時間,同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存搖籃。
用于流式細胞儀檢測時持續創新,如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細胞,并且通過調(diào)整相關設置和參數(shù)也無法改善使用,可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進行檢測分析,這樣通常可以有效減少假陽性的壞死細胞不難發現。
需自備PBS合規意識。
本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學研究用,不得用于臨床診斷或治療推動,不得用于食品或藥品協調機製,不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康有效性,請穿實驗服并戴一次性手套操作高質量發展。