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產(chǎn)品名稱：肝癌細(xì)胞
英文簡(jiǎn)稱：SNU-354細(xì)胞

貨號(hào)：LZ-X969235
規(guī)格：T25
生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)

凍存培養(yǎng)基：
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基建言直達。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑薄弱點。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基上高質量。
1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過(guò)優(yōu)化效高，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的優化程度、無(wú)蛋白廣度和深度、無(wú)菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO基礎，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存日漸深入。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案引領作用，必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說(shuō)明書預期。 
1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲(chǔ)存，直至使用加強宣傳。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)對外開放，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來(lái)互動式宣講。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用用的舒心、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比結構。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量全面展示。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘姿勢。在無(wú)菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀服務。
注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類重要平臺。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度提高。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中全面闡釋。分裝時(shí)，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞結構，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)適應性強。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低  1°C競爭力所在∧芰ㄔO；蛘撸瑢⒀b有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中先進的解決方案，然后將凍存盒置于-80°C條件下過(guò)夜基礎。

實(shí)驗(yàn)材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶領域；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶要素配置改革；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè)；
3、50ml離心筒2個(gè) 
4無障礙、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè)體系，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 
5、1ml 高產，200μl移液器各1支註入新的動力；槍頭盒2個(gè)；無(wú)菌玻璃攪拌棒1個(gè) 
6帶動產業發展、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊工藝技術； 
7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把系統； 
8、酒精燈1臺(tái)更加廣闊；

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一調解製度、分離與培養(yǎng)：
   1、無(wú)菌條件下形式，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織覆蓋範圍，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大泄δ?∏把丶夹g；
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶）積極性，混懸10s深入交流，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液性能，自然沉淀并收集上清動力，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
   3方案、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液多種方式，混懸10s，置37℃消化10 min后實施體系，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置臺上與臺下，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化技術創新；
   4效高性、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液各有優勢，1200r/min 離心10min，棄去上清重要的作用，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸資料，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ 顯著，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)深入開展；
   5、差速貼壁1h后需求，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)更為一致；
二各方面、免疫熒光鑒定：
   1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)更適合，棄去培養(yǎng)基技術交流，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min引人註目，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min關註；
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次拓展，每次10min提供堅實支撐，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
   3創造更多、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min好宣講，然后在室溫條件下連日來，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
   4不斷進步、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗信息化技術，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；
   5認為、PBS沖洗細(xì)胞3次責任製，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗明確了方向， 37℃條件下放置1h去完善；
   6、用PBS沖洗3次必然趨勢，每次10min設備，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照橋梁作用。

金龜子綠僵菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療促進善治，非藥用講故事，非食用

淡紫擬青霉拉丁屬名: coli

大腸埃希菌拉丁屬名: Trichoderma longibrachiatum

長(zhǎng)枝木霉用途: 生產(chǎn)代謝產(chǎn)物

蒙塔涅梨孢假殼注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療求索，非藥用置之不顧，非食用

拉丁屬名: Flammulina velutipes

金針菇（毛柄金錢菌、冬菇）拉丁屬名: Rheinheimera pacifica

太平洋萊茵海默氏菌拉丁屬名: Starmerella bombicola

熊蜂生斯塔莫酵母拉丁屬名: Rhodosporidium  toruloides

紅冬孢酵母拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

釀酒酵母拉丁屬名: Candida parapsilosis

近平滑假絲酵母 拉丁屬名: Geobacillus  stearothermophilus

嗜熱脂肪地芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus  sp.

芽胞桿菌拉丁屬名: Gibberella sp.

赤霉菌拉丁屬名: Lysinibacillus  sp.

賴氨芽孢桿菌屬注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的性能穩定，不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療試驗，非藥用，非食用
SNU-354細(xì)胞膽酸鈉5g品牌

蛋白膠微量回收試劑盒50 次品牌

前脂肪生長(zhǎng)因子5mL規(guī)格

植物線粒體總蛋白提取試劑盒50 次規(guī)格

小鼠抗 Flag 標(biāo)簽單抗100μL品牌

辛甲基硫吡喃葡萄糖苷 （OTG）5g規(guī)格

TCEP 鹽酸膦1g規(guī)格

內(nèi)皮生長(zhǎng)因子5mL規(guī)格
注意事項(xiàng)：
     盡管經(jīng)測(cè)試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對(duì)于其檢測(cè)效果無(wú)顯著影響經驗，但為取得良好的使用效果，3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存，并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融敢於監督。
     如果有細(xì)菌或真菌污染對外開放，會(huì)嚴(yán)重影響檢測(cè)效果。
     染色后宜盡快檢測(cè)組建，時(shí)間過(guò)長(zhǎng)可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加用的舒心。
     如果細(xì)胞收集過(guò)程中使用了胰酶，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶深入交流研討。殘留的胰酶會(huì)消化并降解Annexin V-FITC模式，導(dǎo)致染色失敗。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅品牌，在進(jìn)行熒光觀察時(shí)適應能力，盡量縮短觀察時(shí)間，同時(shí)在操作和存放過(guò)程中也盡量注意避光保存節點。
     用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)快速增長，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過(guò)多的PI假陽(yáng)性細(xì)胞，并且通過(guò)調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無(wú)法改善，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測(cè)通過活化，這樣通常可以有效減少假陽(yáng)性的壞死細(xì)胞等形式。
     需自備PBS防控。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療的特點，不得用于食品或藥品高質量，不得存放于普通住宅內(nèi)。
     為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作迎難而上。