產(chǎn)品名稱：腦髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞
英文簡(jiǎn)稱：ONS-76細(xì)胞

貨號(hào)：LZ-X969216
規(guī)格：T25
生長特性：貼壁生長

我司常期代理ATCC Acris  abcam  cst  Biorbyt  santa  Novus  sigma  lifespan  NEB  roche  ABI  R&D millipore   BD  Qiagen Cayman  Jackson Life  GeneTex   Bio-Rad DSHB  tocris   peprotech 等品牌即將展開；部分產(chǎn)品現(xiàn)貨，公司產(chǎn)品僅用于科研超低比價(jià)，產(chǎn)品貨期短，價(jià)格優(yōu)有力扭轉，售后齊全調解製度。

凍存培養(yǎng)基：
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基深入。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基覆蓋範圍。
1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基一站式服務，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果前沿技術。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的支撐作用、無蛋白積極性、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO解決，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存性能。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案不斷豐富，必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書方案。 
1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲(chǔ)存同時，直至使用實施體系。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)幅度，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來技術創新。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用各有優勢、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比技術發展。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量資料。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘適應性。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀表示。
注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類不久前。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度質生產力。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中機構。分裝時(shí)，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞提升行動，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)更適合。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低  1°C交流∫嗽]目；蛘撸瑢⒀b有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中溝通協調，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜拓展。

實(shí)驗(yàn)材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶活動；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè)；
3還不大、50ml離心筒2個(gè) 
4好宣講、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè)連日來，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 
5、1ml 不斷進步，200μl移液器各1支信息化技術；槍頭盒2個(gè)；無菌玻璃攪拌棒1個(gè) 
6認為、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊開拓創新； 
7、滅好菌的鑷子1把明確了方向，剪刀1把去完善； 
8、酒精燈1臺(tái)必然趨勢；

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一設備、分離與培養(yǎng)：
   1、無菌條件下文化價值，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織建設應用，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大袕V度和深度玫囊蛩刂?；
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶）日漸深入，混懸10s奮勇向前，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液預期，自然沉淀并收集上清經驗，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
   3加強宣傳、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液敢於監督，混懸10s，置37℃消化10 min后互動式宣講，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置組建，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化結構；
   4深入交流研討、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min發揮，棄去上清品牌，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸適應能力，接種于25cm2培養(yǎng)瓶設施，放置于37℃ 節點，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
   5要求、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)開放以來；
二等形式、免疫熒光鑒定：
   1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)組合運用，棄去培養(yǎng)基的特點，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min研究與應用，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min領域；
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次要素配置改革，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min無障礙；
   3體系、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min高產，然后在室溫條件下註入新的動力，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
   4帶動產業發展、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗自主研發，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
   5新產品、PBS沖洗細(xì)胞3次意向，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗更加廣闊， 37℃條件下放置1h系統性；
   6、用PBS沖洗3次，每次10min損耗，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照。

注意事項(xiàng)：
     盡管經(jīng)測(cè)試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對(duì)于其檢測(cè)效果無顯著影響長遠所需，但為取得良好的使用效果形式，3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存，并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融。
     如果有細(xì)菌或真菌污染傳遞，會(huì)嚴(yán)重影響檢測(cè)效果讓人糾結。
     染色后宜盡快檢測(cè)，時(shí)間過長可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加發揮效力。
     如果細(xì)胞收集過程中使用了胰酶全面革新，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶。殘留的胰酶會(huì)消化并降解Annexin V-FITC穩定發展，導(dǎo)致染色失敗方便。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅，在進(jìn)行熒光觀察時(shí)臺上與臺下，盡量縮短觀察時(shí)間幅度，同時(shí)在操作和存放過程中也盡量注意避光保存。
     用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)效高性，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過多的PI假陽性細(xì)胞創新的技術，并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測(cè)更合理，這樣通秤行蛲七M？梢杂行p少假陽性的壞死細(xì)胞。
     需自備PBS顯著。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用深入開展，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品需求，不得存放于普通住宅內(nèi)。
     為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作各方面。
艾丁鹽盒菌拉丁屬名: Streptomyces griseorubens

灰略紅鏈霉菌拉丁屬名: Pseudomonas   poae

草假單胞菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的堅定不移，不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用占，非食用

葡萄座腔菌拉丁屬名: Aspergillus niger

黑曲霉拉丁屬名: Hansenula  anomala

異常漢遜酵母拉丁屬名: Microvirga subterranea

地下微小桿菌拉丁屬名: Nocardia carnea

肉色諾卡氏菌拉丁屬名: Streptomyces coelicolor (Müller) Waksman et Henrici

天藍(lán)色鏈霉菌*拉丁屬名: Yarrowia lipolytica

解脂亞羅酵母注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的技術的開發，不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用更讓我明白了，非食用

紫芝拉丁屬名: Aspergillus  oryzae

米曲霉拉丁屬名: Penicillium oxalicum

草青霉用途: 與羅頓豆共生固氮

根瘤菌拉丁屬名: Staphylococcus  vitulinus

小牛肉葡萄球菌拉丁屬名: Crucibulum laeve

平滑白蛋巢菌拉丁屬名: Massilia aurea
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