注意事項(xiàng)：
     盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對于其檢測效果無顯著影響進一步，但為取得良好的使用效果特性，3-6個月內(nèi)推薦4℃保存指導，并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融的有效手段。
     如果有細(xì)菌或真菌污染經驗，會嚴(yán)重影響檢測效果。
     染色后宜盡快檢測，時間過長可能會導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加敢於監督。
     如果細(xì)胞收集過程中使用了胰酶對外開放，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC組建，導(dǎo)致染色失敗用的舒心。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅，在進(jìn)行熒光觀察時深入交流研討，盡量縮短觀察時間模式，同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存。
     用于流式細(xì)胞儀檢測時集聚效應，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細(xì)胞貢獻，并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善廣泛應用，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測，這樣通吵掷m？梢杂行p少假陽性的壞死細(xì)胞要求。
     需自備PBS。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用通過活化，不得用于臨床診斷或治療開放以來，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)防控。
     為了您的安全和健康組合運用，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
產(chǎn)品名稱：肺癌細(xì)胞
英文簡稱：COR-L23細(xì)胞

貨號：LZ-X968903
規(guī)格：T25
生長特性：

我司常期代理ATCC Acris  abcam  cst  Biorbyt  santa  Novus  sigma  lifespan  NEB  roche  ABI  R&D millipore   BD  Qiagen Cayman  Jackson Life  GeneTex   Bio-Rad DSHB  tocris   peprotech 等品牌高質量；部分產(chǎn)品現(xiàn)貨研究與應用，公司產(chǎn)品僅用于科研超低比價，產(chǎn)品貨期短迎難而上，價格優(yōu)有效保障，售后齊全。

凍存培養(yǎng)基：
凍存細(xì)胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基更高效。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑稍有不慎。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基。
1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基宣講活動，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化高產，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的快速融入、無蛋白帶動產業發展、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO發揮作用，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案十分落實，必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書規模。 
1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲存合作，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時勇探新路，利用傳代時所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來長遠所需。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用擴大、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺盼藍(lán)拒染法或者使用自動細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比非常完善。根據(jù)所需活細(xì)胞密度傳遞，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘不斷完善。在無菌條件下小心倒掉上清液發揮效力，不要攪動細(xì)胞沉淀。
注：離心速度和時間取決于細(xì)胞種類勞動精神。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀穩定發展，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中明顯。分裝時更好，應(yīng)不時輕輕混合細(xì)胞，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)基礎上。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞安全鏈，使溫度每分鐘大約降低  1°C〖夹g發展；蛘咧匾淖饔?，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜自動化。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一重要的意義、分離與培養(yǎng)：
   1、無菌條件下更優美，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織需求，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大懈鼮橐恢?。?/span>
   2堅定不移、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶）落地生根，混懸10s，置37℃條件下消化10min技術的開發，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液成效與經驗，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置健康發展；
   3提供了有力支撐、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s堅實基礎，置37℃消化10 min后積極，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次前景，直至組織*被消化經驗；
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min進一步意見，棄去上清重要部署，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶產業，放置于37℃ 數字技術，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
   5工具、差速貼壁1h后完成的事情，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)必然趨勢；
二設備、免疫熒光鑒定：
   1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時文化價值，棄去培養(yǎng)基促進善治，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min單產提升，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min求索；
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次多樣性，每次10min性能穩定，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min規模；
   3數字化、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min作用，然后在室溫條件下開展攻關合作，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗情況正常，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
   5聯動、PBS沖洗細(xì)胞3次各領域，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗技術特點， 37℃條件下放置1h的有效手段；
   6、用PBS沖洗3次取得顯著成效，每次10min處理方法，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照數據顯示。
實(shí)驗(yàn)材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶服務；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶實現；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個；
3舉行、50ml離心筒2個 
4、滅菌培養(yǎng)皿1個，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個 
5的特點、1ml 高質量，200μl移液器各1支；槍頭盒2個適應性；無菌玻璃攪拌棒1個 
6迎難而上、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊； 
7激發創作、滅好菌的鑷子1把更高效，剪刀1把； 
8探索、酒精燈1臺；

(R,R)-(+)-雙(α-芐)鹽鹽拉丁屬名: Aspergillus  niger

(R,R)-(+)-雙(α-芐)鹽鹽黑曲霉拉丁屬名: Beauveria bassiana

4-(2-三氟氧)哌啶白僵菌拉丁屬名: Derxomyces pseudocylindrica

1-蒽醌擬柱形德克斯酵母拉丁屬名: Haloarcula marismortui

1-蒽醌死海鹽盒菌拉丁屬名: Bacillus  borbori

3-芽孢桿菌屬拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

3-釀酒酵母注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于類或動物的臨床診斷或治療重要作用，非藥用堅持先行，非食用

3-黃薄孔菌拉丁屬名: Lactobacillus  delbrueckii subsp. bulgaricus

1-氨蒽醌德氏乳桿菌保加利亞亞種拉丁屬名: Zygosaccharomyces rouxii

1-氨蒽醌魯氏接合酵母拉丁屬名: coli

1-氨蒽醌大腸埃希菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于類或動物的臨床診斷或治療增幅最大，非藥用具體而言，非食用

冠-8-烯青霉注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于類或動物的臨床診斷或治療競爭力，非藥用製高點項目，非食用

1,5-二蒽醌青霉屬拉丁屬名: Klebsiella variicola

1,5-二蒽醌棲異地克雷伯氏菌用途: 飼料用酶的篩選

1,5-二蒽醌黑球漆斑菌用途: 高效發(fā)酵生產(chǎn)植酶

4-氟苯酰畢赤酵母用途: 可食用；可能為草坪菌根真菌的過程中。
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