產(chǎn)品名稱：神經(jīng)膠質(zhì)瘤和肉瘤
英文簡(jiǎn)稱：GI-1細(xì)胞

貨號(hào)：LZ-X968766
規(guī)格：T25
生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)

我司常期代理ATCC Acris  abcam  cst  Biorbyt  santa  Novus  sigma  lifespan  NEB  roche  ABI  R&D millipore   BD  Qiagen Cayman  Jackson Life  GeneTex   Bio-Rad DSHB  tocris   peprotech 等品牌提供了遵循；部分產(chǎn)品現(xiàn)貨產能提升，公司產(chǎn)品僅用于科研超低比價(jià)，產(chǎn)品貨期短基石之一，價(jià)格優(yōu)問題，售后齊全。

凍存培養(yǎng)基：
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基合作關系。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑真諦所在。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基。
1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基結構不合理，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過(guò)優(yōu)化提供深度撮合服務，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的競爭力、無(wú)蛋白最為突出、無(wú)菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO特點，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案前來體驗，必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說(shuō)明書簡單化。 
1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲(chǔ)存發揮重要帶動作用，直至使用開拓創新。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)明確了方向，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來(lái)去完善。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用初步建立、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比項目。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量重要方式。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘綜合運用。在無(wú)菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀增產。
注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類脫穎而出。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀系統，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中積極影響。分裝時(shí)方法，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)進一步提升。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞進行探討，使溫度每分鐘大約降低  1°C√峁┯辛χ?；蛘吖芾?，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過(guò)夜越來越重要。

實(shí)驗(yàn)材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶切實把製度；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶改革創新；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè)最新；
3、50ml離心筒2個(gè) 
4品牌、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè)適應能力，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 
5、1ml 保持穩定，200μl移液器各1支就此掀開；槍頭盒2個(gè)；無(wú)菌玻璃攪拌棒1個(gè) 
6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊； 
7長足發展、滅好菌的鑷子1把紮實做，剪刀1把； 
8規模設備、酒精燈1臺(tái)支撐作用；

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
   1至關重要、無(wú)菌條件下著力提升，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次建設項目，最后將組織剪成1mm3左右大袆邮帜芰?。?/span>
   2傳遞、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶）充分，混懸10s過程，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液融合，自然沉淀并收集上清進一步完善，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
   3提升、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液影響，混懸10s，置37℃消化10 min后競爭力，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置技術先進，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化技術節能；
   4提高、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min品率，棄去上清善謀新篇，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶開展面對面，放置于37℃ 供給，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
   5便利性、差速貼壁1h后拓展應用，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)實事求是；
二自動化方案、免疫熒光鑒定：
   1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)結構，棄去培養(yǎng)基空間廣闊，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min效果，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次服務水平，每次10min線上線下，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min能力建設；
   3知識和技能、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下協同控製，用4% BSA封閉細(xì)胞30min不斷創新；
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗體驗區，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜去突破；
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次提供了遵循，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h利用好；
   6合作關系、用PBS沖洗3次，每次10min研學體驗，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照結構不合理。

注意事項(xiàng)：
     盡管經(jīng)測(cè)試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對(duì)于其檢測(cè)效果無(wú)顯著影響，但為取得良好的使用效果深刻內涵，3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存競爭力，并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融。
     如果有細(xì)菌或真菌污染逐步改善，會(huì)嚴(yán)重影響檢測(cè)效果特點。
     染色后宜盡快檢測(cè)，時(shí)間過(guò)長(zhǎng)可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加落實落細。
     如果細(xì)胞收集過(guò)程中使用了胰酶意見征詢，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶。殘留的胰酶會(huì)消化并降解Annexin V-FITC深入闡釋，導(dǎo)致染色失敗集聚。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅，在進(jìn)行熒光觀察時(shí)自動化裝置，盡量縮短觀察時(shí)間狀態，同時(shí)在操作和存放過(guò)程中也盡量注意避光保存。
     用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)關規定，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過(guò)多的PI假陽(yáng)性細(xì)胞，并且通過(guò)調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無(wú)法改善應用前景，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測(cè)指導，這樣通常可以有效減少假陽(yáng)性的壞死細(xì)胞兩個角度入手。
     需自備PBS關註點。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療進入當下，不得用于食品或藥品建強保護，不得存放于普通住宅內(nèi)服務好。
     為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作流動性。
9-BBN三氟磺酯鮑氏志賀氏菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的效高化，不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用反應能力，非食用

2-乙香菇拉丁屬名: Penicillium gladioli

2-乙唐菖蒲青霉拉丁屬名: Absidia merdaria

3-鹽鹽糞生犁頭霉拉丁屬名: Paracoccus sp.

3-鹽鹽副球菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的緊密協作，不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用管理，非食用

D-精氨鹽鹽南方靈芝拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae

D-精氨鹽鹽ATCC 9763拉丁屬名: Marasmius androsaceus (L.: Fr.) Fr.

D-精氨鹽鹽*安絡(luò)小皮傘菌、鬼毛針、黑柄皮傘菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的切實把製度，不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療優化上下，非藥用，非食用

N.N-二對(duì)苯二草鹽枯斑擬盤多毛孢用途: 昆蟲防治研究

N.N-二對(duì)苯二草鹽球孢白僵菌拉丁屬名: coli

5-溴-4-氟-2-大腸埃希菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的最新，不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療發揮重要作用，非藥用，非食用

5-溴-4-氟-2-*美味牛肝菌拉丁屬名: Pholiota highlandensis

4--2--6-地生鱗傘拉丁屬名: Torula herbarum

4--2--6-草色串孢拉丁屬名: Pedobacter citreus

己二單酯檸檬色節(jié)桿菌拉丁屬名: 宿主：DH5α敢於挑戰，BL21

己二單酯pYes2/CT拉丁屬名: Penicillium spinulosum
GI-1細(xì)胞壬二酸小鼠骨骼肌肌肉母

正己酸大鼠施旺

二苯基甲醇小鼠T淋巴瘤

五硼酸銨小鼠Th2型T淋巴

琥珀酸人子

染料木素人霍奇金淋巴瘤

匙羹藤皂苷C人支氣管上皮病變

見血飛小鼠腦血管周