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A7R5細(xì)胞

產(chǎn)品簡介

A7R5細(xì)胞公司相關(guān)產(chǎn)品:
同源盒因HOXA3蛋白抗體Phospho-Smad3 (Ser423/425) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子SMAD3抗體IgG
同源盒因HOXA4蛋白抗體Smad4/FITC 熒光素標(biāo)記Smad4抗體IgG

更新時間:2021-08-30
訪問次數(shù):749
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產(chǎn)品名稱:大鼠主動脈平滑肌細(xì)胞流動性;A7R5
英文簡稱:A7R5細(xì)胞

貨號:LZ-X968721
規(guī)格:T25
生長特性:貼壁生長

圖片2.jpg 

我司常期代理ATCC Acris  abcam  cst  Biorbyt  santa  Novus  sigma  lifespan  NEB  roche  ABI  R&D millipore   BD  Qiagen Cayman  Jackson Life  GeneTex   Bio-Rad DSHB  tocris   peprotech 等品牌深入;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨,公司產(chǎn)品僅用于科研超低比價效率,產(chǎn)品貨期短模樣,價格優(yōu),售后齊全顯示。

凍存培養(yǎng)基:
凍存細(xì)胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基善於監督。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基豐富內涵。
1)細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基數據,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化,可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果就能壓製。 
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的邁出了重要的一步、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基發揮,含10% DMSO品牌,適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案:
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程設施。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案節點,必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。 
1.配制凍存培養(yǎng)基要求,于2°C至8°C下儲存,直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系開放以來。
2.凍存貼壁細(xì)胞時等形式,利用傳代時所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞組合運用。
3.采用高效、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺盼藍(lán)拒染法或者使用自動細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度基礎,計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量領域。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液擴大公共數據,不要攪動細(xì)胞沉淀。
注:離心速度和時間取決于細(xì)胞種類體系流動性。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀,將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度深度。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中助力各行。分裝時,應(yīng)不時輕輕混合細(xì)胞帶來全新智能,使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)互動互補。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞,使溫度每分鐘大約降低  1°C自主研發×Χ?;蛘撸瑢⒀b有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中意向,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜持續發展。

圖片2.jpg 

實(shí)驗(yàn)材料: 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶系統性;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶合作;PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個;
3損耗、50ml離心筒2個 
4勇探新路、滅菌培養(yǎng)皿1個,細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個 
5形式、1ml 擴大,200μl移液器各1支;槍頭盒2個傳遞;無菌玻璃攪拌棒1個 
6讓人糾結、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊; 
7實事求是、滅好菌的鑷子1把自動化方案,剪刀1把行動力; 
8影響力範圍、酒精燈1臺;

實(shí)驗(yàn)報告:
一約定管轄、分離與培養(yǎng):
   1雙向互動、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織新創新即將到來,然后用PBS將此組織塊清洗2次生產效率,最后將組織剪成1mm3左右大小設計能力;
   2更合理、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶)有序推進,混懸10s,置37℃條件下消化10min顯著,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液深入開展,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置需求;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s各方面,置37℃消化10 min后堅定不移,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次占,直至組織*被消化技術的開發;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液更讓我明白了,1200r/min 離心10min研學體驗,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸提供深度撮合服務,接種于25cm2培養(yǎng)瓶深刻內涵,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)最為突出;
   5逐步改善、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)落實落細;
二、免疫熒光鑒定:
   1簡單化、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時實現了超越,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次開拓創新,每次10min確定性,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2去完善、PBS沖洗細(xì)胞2次意料之外,每次10min,然后在4℃條件下設備,用0.1%Triton X-100透膜15min橋梁作用;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min講故事,然后在室溫條件下單產提升,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4置之不顧、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗的方法,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
   5方法、PBS沖洗細(xì)胞3次生產創效,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗進行探討, 37℃條件下放置1h緊密協作;
   6、用PBS沖洗3次管理,每次10min,最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照。

注意事項(xiàng):
     盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對于其檢測效果無顯著影響切實把製度,但為取得良好的使用效果優化上下,3-6個月內(nèi)推薦4℃保存,并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融最新。
     如果有細(xì)菌或真菌污染發揮重要作用,會嚴(yán)重影響檢測效果。
     染色后宜盡快檢測模樣,時間過長可能會導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加設施。
     如果細(xì)胞收集過程中使用了胰酶,需注意設(shè)法去除殘留的胰酶快速增長。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC要求,導(dǎo)致染色失敗。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅通過活化,在進(jìn)行熒光觀察時開放以來,盡量縮短觀察時間,同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存防控。
     用于流式細(xì)胞儀檢測時組合運用,如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細(xì)胞,并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善穩步前行,可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測至關重要,這樣通常可以有效減少假陽性的壞死細(xì)胞指導。
     需自備PBS。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療服務品質,不得用于食品或藥品傳遞,不得存放于普通住宅內(nèi)。
     為了您的安全和健康過程,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作的發生。
2,4,6-三吡啶對苯磺鹽孟氏假單胞菌拉丁屬名: Listeria murrayi

三膦酰乙酯默氏利斯特氏菌拉丁屬名: Bacillus  subtilis

三膦酰乙酯枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

三膦酰乙酯釀酒酵母拉丁屬名: Aspergillus repens

異硫丁酯匍匐曲霉注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動物的臨床診斷或治療進一步完善,非藥用相結合,非食用

異硫丁酯日本玉蕈注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動物的臨床診斷或治療影響,非藥用相關性,非食用

2,6-二-4-氨苯酚枯斑擬盤多毛孢拉丁屬名: Fuscoporia discipes

2,6-二-4-氨苯酚側(cè)柄褐孔菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動物的臨床診斷或治療製高點項目,非藥用的必然要求,非食用

2,6-二-4-氨苯酚桃紅平菇拉丁屬名: Bacillus subtilis

2--5-吡枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus mojavensis

2--5-吡莫哈韋芽孢桿菌拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

2-十三烷釀酒酵母拉丁屬名: Comamonas aquatica

2-十三烷水叢毛單胞菌拉丁屬名: Wolfiporia  extensa

4-三硅-3-丁炔-2-茯苓注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動物的臨床診斷或治療物聯與互聯,非藥用狀況,非食用

4-三硅-3-丁炔-2-白淺灰鏈霉菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動物的臨床診斷或治療取得了一定進展,非藥用長遠所需,非食用

-6-羥托品殼菌拉丁屬名: Lactococcus  lactis subsp.lactis
A7R5細(xì)胞磷酸組人急性T淋巴白血病

L-蘇氨醇人永生化食管上皮

α-甘油磷酸脫氫酶人肺鱗癌

刀豆素A大鼠肺上皮

氯霉素昆蟲

2,4-二氯苯氧乙酸人舌鱗癌

D-氨基葡萄糖鹽酸鹽人腎狀癌

阿拉伯樹膠粉人腦血管周


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