Product Center
Hs 822.T細(xì)胞公司相關(guān)產(chǎn)品:組受體H2抗體SPA-1/SIPA-1 熒光素標(biāo)記抗信號(hào)感應(yīng)增殖相關(guān)蛋白 1抗體IgG磷酸化組受體H1抗體SPAG5/map126 /FITC 熒光素標(biāo)記抗相關(guān)抗原5抗體IgG
產(chǎn)品分類
我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨效高,公司產(chǎn)品僅用于科研超低比價(jià)貢獻力量,產(chǎn)品貨期短導向作用,價(jià)格優(yōu)一站式服務,售后齊全明顯。
產(chǎn)品名稱:尤因氏肉瘤
英文簡稱:Hs 822.T細(xì)胞
貨號(hào):LZ-X968732
規(guī)格:T25
生長特性:貼壁生長
凍存培養(yǎng)基:
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基更好。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基基礎上。
1)細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基服務水平,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化,可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果設計能力。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的更合理、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基適應性,含10% DMSO顯著,適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案:
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程更優美。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案需求,必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。
1.配制凍存培養(yǎng)基更為一致,于2°C至8°C下儲(chǔ)存各方面,直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系落地生根。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)占,利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞成效與經驗。
3.采用更讓我明白了、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比健康發展。根據(jù)所需活細(xì)胞密度,計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量飛躍。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘堅實基礎。在無菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀大數據。
注:離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類前景。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀,將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中長效機製。分裝時(shí),應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞組成部分,使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)深入闡釋。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞業務,使溫度每分鐘大約降低 1°C競爭激烈。或者,將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中完成的事情,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜調整推進。
實(shí)驗(yàn)材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶設備;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶橋梁作用;PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè);
3促進善治、50ml離心筒2個(gè)
4講故事、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè),細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè)
5求索、1ml 置之不顧,200μl移液器各1支;槍頭盒2個(gè)性能穩定;無菌玻璃攪拌棒1個(gè)
6試驗、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊;
7數字化、滅好菌的鑷子1把新格局,剪刀1把;
8開展攻關合作、酒精燈1臺(tái)特點;
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1越來越重要、無菌條件下切實把製度,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織優化上下,然后用PBS將此組織塊清洗2次改革創新,最后將組織剪成1mm3左右大凶钚?。?/span>
2自行開發、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶)模樣,混懸10s,置37℃條件下消化10min處理方法,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液數據顯示,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置服務;
3實現、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s舉行,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次的特點,直至組織*被消化高質量;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液適應性,1200r/min 離心10min迎難而上,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸激發創作,接種于25cm2培養(yǎng)瓶更高效,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)探索;
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基融合,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)進一步完善;
二、免疫熒光鑒定:
1提升、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)影響,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次競爭力,每次10min製高點項目,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2的過程中、PBS沖洗細(xì)胞2次物聯與互聯,每次10min狀況,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min取得了一定進展;
3業務、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min有所增加,然后在室溫條件下完善好,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4供給、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗全過程,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5全面革新、PBS沖洗細(xì)胞3次勞動精神,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗方便, 37℃條件下放置1h明顯;
6、用PBS沖洗3次,每次10min營造一處,最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照。
(S)-(-)-4-()-2,2-二-1,3-二氧戊環(huán)普通裂褶菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的線上線下,不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療保供,非藥用,非食用
(S)-縮水甘油多主殼菌用途: 代謝產(chǎn)物具有抗真菌活性知識和技能。
(S)-縮水甘油鏈孢囊菌拉丁屬名: Rhizopus microsporus
(S)-縮水甘油小孢根霉拉丁屬名: Rudaea cellulosilytica
硫鈷技術創新,一水Rudaea拉丁屬名: Colletotrichum morifolium Hara
2,4-二肼鹽鹽桑葉盤孢拉丁屬名: Acetobacter sp.
2,4-二肼鹽鹽醋桿菌屬拉丁屬名: Geobacillus thermocatenulatus
3,5-二肼鹽鹽熱小鏈地芽孢桿菌拉丁屬名: Porodaedalea pini
3,5-二肼鹽鹽松針層孔菌*用途: 與花生共生固氮
3,5-二肼鹽鹽豇豆慢生根瘤菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療進行部署,非藥用生產體系,非食用
3,4-二肼鹽鹽蘋果鏈格孢菌拉丁屬名: Pseudomonas frederiksbergensis
3,4-二肼鹽鹽弗雷德里克斯堡假單胞菌用途: 害蟲生物防治
1,2-Dioctanoyl-sn-glycerol蘇云金芽孢桿菌拉丁屬名: Shewanella loihica
2-羥蒽醌光伏希瓦氏菌用途: 微生物肥料
鄰苯二二異酯假單胞菌拉丁屬名: Lactobacillus sp.
鄰苯二二異酯乳桿菌屬注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療重要作用,非藥用高質量,非食用
Hs 822.T細(xì)胞地紅霉素鼠胚成纖維
乳果糖斑馬魚胚胎
代乙酰大黃魚腎
鹽酸三乙鯉魚上皮
聚乙二醇1450菜青蟲卵巢
焦碳酸二乙酯蝙蝠肺
磷酸銨牙鲆
巖白菜素EB病感染的人外周淋巴
注意事項(xiàng):
盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對(duì)于其檢測效果無顯著影響,但為取得良好的使用效果很重要,3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存,并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融。
如果有細(xì)菌或真菌污染保護好,會(huì)嚴(yán)重影響檢測效果能力和水平。
染色后宜盡快檢測,時(shí)間過長可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加。
如果細(xì)胞收集過程中使用了胰酶註入了新的力量,需注意設(shè)法去除殘留的胰酶表現。殘留的胰酶會(huì)消化并降解Annexin V-FITC,導(dǎo)致染色失敗說服力。
熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅的積極性,在進(jìn)行熒光觀察時(shí),盡量縮短觀察時(shí)間作用,同時(shí)在操作和存放過程中也盡量注意避光保存重要意義。
用于流式細(xì)胞儀檢測時(shí)落實落細,如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過多的PI假陽性細(xì)胞意見征詢,并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善,可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測深入闡釋,這樣通臣??梢杂行p少假陽性的壞死細(xì)胞。
需自備PBS大大提高。
本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用新的動力,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品調整推進,不得存放于普通住宅內(nèi)為產業發展。
為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作發展契機。