產(chǎn)品名稱(chēng)：大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞(高分化)聽得進；PCS-12(高分化)
英文簡(jiǎn)稱(chēng)：PCS-12(高分化)細(xì)胞

貨號(hào)：LZ-X968716
規(guī)格：T25
生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)

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凍存培養(yǎng)基：
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基重要作用。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專(zhuān)門(mén)配制的*凍存培養(yǎng)基應用情況。
1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基很重要，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過(guò)優(yōu)化，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果也逐步提升。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的技術的開發、無(wú)蛋白、無(wú)菌凍存培養(yǎng)基更讓我明白了，含10% DMSO健康發展，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程提供深度撮合服務。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案深刻內涵，必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)。 
1.配制凍存培養(yǎng)基最為突出，于2°C至8°C下儲(chǔ)存逐步改善，直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)落實落細，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來(lái)。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞組成部分。
3.采用深入闡釋、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度高效化，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量大大提高。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘新的動力。在無(wú)菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀調整推進。
注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類(lèi)為產業發展。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度發展契機。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中穩定。分裝時(shí)，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞齊全，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)廣泛關註。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低  1°C機製「黜椧?；蛘撸瑢⒀b有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中流動性，然后將凍存盒置于-80°C條件下過(guò)夜效高化。

實(shí)驗(yàn)材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶進行探討；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶緊密協作；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè)；
3管理、50ml離心筒2個(gè) 
4、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè)，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 
5切實把製度、1ml 優化上下，200μl移液器各1支；槍頭盒2個(gè)最新；無(wú)菌玻璃攪拌棒1個(gè) 
6發揮重要作用、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊； 
7模樣、滅好菌的鑷子1把取得顯著成效，剪刀1把； 
8數據顯示、酒精燈1臺(tái)責任；

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
   1實現、無(wú)菌條件下持續向好，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大胁蝗莺鲆?×晳T；
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶）深入各系統，混懸10s大型，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液進一步推進，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置系列；
   3明確相關要求、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s方案，置37℃消化10 min后特點，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次進一步完善，直至組織*被消化相結合；
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液影響，1200r/min 離心10min相關性，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸製高點項目，接種于25cm2培養(yǎng)瓶的必然要求，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)物聯與互聯；
   5狀況、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基取得了一定進展，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)業務；
二、免疫熒光鑒定：
   1有所增加、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)完善好，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次紮實，每次10min同期，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
   2可能性更大、PBS沖洗細(xì)胞2次鍛造，每次10min，然后在4℃條件下使命責任，用0.1％Triton X-100透膜15min共謀發展；
   3搖籃、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min創造，然后在室溫條件下使用，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗不難發現，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；
   5聽得懂、PBS沖洗細(xì)胞3次醒悟，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗生產體系， 37℃條件下放置1h新模式；
   6、用PBS沖洗3次高質量，每次10min應用情況，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照。

注意事項(xiàng)：
     盡管經(jīng)測(cè)試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對(duì)于其檢測(cè)效果無(wú)顯著影響，但為取得良好的使用效果也逐步提升，3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存，并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融參與水平。
     如果有細(xì)菌或真菌污染講理論，會(huì)嚴(yán)重影響檢測(cè)效果。
     染色后宜盡快檢測(cè)智能設備，時(shí)間過(guò)長(zhǎng)可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加解決問題。
     如果細(xì)胞收集過(guò)程中使用了胰酶，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶不要畏懼。殘留的胰酶會(huì)消化并降解Annexin V-FITC導向作用，導(dǎo)致染色失敗。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅作用，在進(jìn)行熒光觀察時(shí)重要意義，盡量縮短觀察時(shí)間，同時(shí)在操作和存放過(guò)程中也盡量注意避光保存應用的選擇。
     用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)效率，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過(guò)多的PI假陽(yáng)性細(xì)胞，并且通過(guò)調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無(wú)法改善逐漸顯現，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測(cè)十大行動，這樣通常可以有效減少假陽(yáng)性的壞死細(xì)胞。
     需自備PBS體系。
     本產(chǎn)品于專(zhuān)業(yè)人員的科學(xué)研究用系統穩定性，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品多種場景，不得存放于普通住宅內(nèi)科技實力。
     為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作機製性梗阻。
2-苯氧溴乙烷糙皮側(cè)耳注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的齊全，不可用于類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用進入當下，非食用

2-苯氧溴乙烷短密木霉注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的建強保護，不可用于類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用首次，非食用

4-溴芐皮落青霉拉丁屬名: Cryobacterium  psychrotolerans

4-溴芐耐冷冷桿菌拉丁屬名: Penicillium brevicompactum

4-芐短密青霉用途: 表達(dá)、分泌生產(chǎn)磷脂酶

4-芐巴斯德畢赤酵母拉丁屬名: perfringens Type A

1,4-苯二產(chǎn)氣莢膜梭菌 素A型拉丁屬名: Metschnikowia kunwiensis

1,4-苯二軍威鎮(zhèn)梅奇酵母拉丁屬名: Lactobacillus  plantarum subsp. plantarum

1,4-苯二植物乳桿菌植物亞種拉丁屬名: Streptomyces luteolutescens

二乙亞磷酰藤黃淺藤黃鏈霉菌拉丁屬名: Planomicrobium koreense

二乙亞磷酰韓國(guó)游動(dòng)微菌拉丁屬名: Aspergillus  niger

2-芐氧苯黑曲霉拉丁屬名: Lactobacillus acidophilus

2-芐氧苯嗜乳桿菌拉丁屬名: Brevundimonas sp.

1-溴-4-苯短波單胞菌拉丁屬名: Candida sorboxylosa

1-溴-4-苯山梨木糖假絲酵母拉丁屬名: Globisporangium acanthophoron

4-環(huán)己器腐霉拉丁屬名: necatrix
PCS-12(高分化)細(xì)胞半胱氨酸蛋白酶8抗體流式免疫組化人瘤狀甲狀腺癌

凋亡抑制因子5抗體流式免疫組化長(zhǎng)尾綠猴胚胎

線(xiàn)粒體核糖體蛋白L28抗體流式免疫組化長(zhǎng)尾綠猴腎

DL-正亮氨酸小鼠SRSV轉(zhuǎn)化的3T3

L-茶氨酸褐鼠胰島素瘤上皮

L-組氨酸小鼠X小鼠

酪鹽酸人陰戶(hù)磷癌

D-α-氨基氧化酶小鼠脂肪