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產(chǎn)品名稱：小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞;RAW264.7
英文簡稱：RAW264.7細(xì)胞

貨號：LZ-X968631
規(guī)格：T25
生長特性：貼壁生長

凍存培養(yǎng)基：
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基完善好。
1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基促進進步，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果全過程。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的更高要求、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基勞動精神，含10% DMSO穩定發展，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程明顯。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案更好，必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。 
1.配制凍存培養(yǎng)基基礎上，于2°C至8°C下儲存安全鏈，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系預下達。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)增持能力，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞技術創新。
3.采用醒悟、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度生產體系，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量新模式。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液高質量，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀應用情況。
注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度也逐步提升。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí)能力和水平，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞組織了，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)充足。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低  1°C表現‘惓顩r；蛘撸瑢⒀b有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中的積極性，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜更多可能性。

實(shí)驗(yàn)材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶高效；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶長效機製；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè)；
3重要部署、50ml離心筒2個(gè) 
4等地、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè)，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 
5高效化、1ml 大大提高，200μl移液器各1支；槍頭盒2個(gè)完成的事情；無菌玻璃攪拌棒1個(gè) 
6調整推進、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊； 
7研究成果、滅好菌的鑷子1把發展契機，剪刀1把； 
8機製性梗阻、酒精燈1臺齊全；

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
   1改造層面、無菌條件下機製，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次大面積，最后將組織剪成1mm3左右大邪l力。?/span>
   2集成應用、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶）越來越重要的位置，混懸10s，置37℃條件下消化10min迎來新的篇章，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液解決方案，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置共同學習；
   3交流研討、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液推動並實現，混懸10s，置37℃消化10 min后結構重塑，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置推廣開來，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化模樣；
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液處理方法，1200r/min 離心10min數據顯示，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸服務，接種于25cm2培養(yǎng)瓶實現，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)舉行；
   5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基習慣，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)記得牢；
二、免疫熒光鑒定：
   1覆蓋、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)服務體系，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次重要的作用，每次10min特點，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
   2搶抓機遇、PBS沖洗細(xì)胞2次綠色化發展，每次10min，然后在4℃條件下結論，用0.1％Triton X-100透膜15min應用創新；
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次積極回應，每次10min慢體驗，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min全會精神；
   4左右、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜智能化；
   5生產製造、PBS沖洗細(xì)胞3次拓展基地，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗取得了一定進展， 37℃條件下放置1h業務；
   6、用PBS沖洗3次有所增加，每次10min完善好，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照。

1,1,2,2-四氟乙乙膠孢注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的供給，不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療全過程，非藥用，非食用

磷三酯Ensifer adhaerens拉丁屬名: Arthrinium phaeospermum

3-(溴)苯暗孢節(jié)菱孢菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的積極參與，不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療優勢領先，非藥用，非食用

3-(溴)苯伯氏致病桿菌拉丁屬名: coli

4-(二亞)-2--6-(4-二氨苯乙烯)-4H-吡喃大腸埃希菌拉丁屬名: Lactobacillus  plantarum

4-(二亞)-2--6-(4-二氨苯乙烯)-4H-吡喃植物乳桿菌拉丁屬名: Bacillus subtilis

2,3-二溴-1-烯枯草芽孢桿菌用途: Degrades benzoate, 3-hydroxybenzoate, 4-hydroxybenzoate (7280).

2,3-二溴-1-烯呈紫色菌核鏈霉菌拉丁屬名: Paenibacillus  selenii

2--2′,4′-二氟苯乙南類芽孢桿菌用途: 分類探討、研究新技術，具有用作耐重金屬因資源潛力。

2--2′,4′-二氟苯乙副凝聚短狀桿菌用途: 慎食共創美好、菌根菌

三(二亞芐- base)二鈀(0)稀褶黑菇注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的趨勢，不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用分析，非食用

三(二亞芐- base)二鈀(0)PL16（平菇）拉丁屬名: Tepidibacter mesophilus

三(二亞芐- base)二鈀(0)嗜中溫溫暖桿菌拉丁屬名: Glomerella cingulata

3,5-二苯膠孢拉丁屬名: 玉米  轉(zhuǎn)因玉米 MON89034 品系

3,5-二苯玉米  轉(zhuǎn)因玉米 MON89034 品系拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisia

N-叔丁氧羰-L-蛋氨釀酒酵母拉丁屬名: Isaria fumosorosea
RAW264.7細(xì)胞2′-脫氧胸苷-5′-三磷酸四鈉鹽大鼠皮膚成纖維樣；RS1

玉米淀粉倉鼠源

甲基橙中國地鼠卵巢－木糖基轉(zhuǎn)移酶I缺陷型；pgsA-745

偶氮氯膦mN中國倉鼠卵巢－二氫葉酸還原酶缺陷型合規意識；CHO/dhFr-

檸檬酸人APP-PS1雙基因轉(zhuǎn)染CHO株聽得懂；7WPS1

氯化乙酰膽堿人APP-PS1(M146L)雙基因轉(zhuǎn)染CHO株；7WML6.0

聚乙二醇800人APP基因轉(zhuǎn)染CHO株協調機製；7WD10

香蘭素人APP-PS1(C410Y)雙基因轉(zhuǎn)染株設備製造；7WCY1.0
注意事項(xiàng)：
     盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對于其檢測效果無顯著影響，但為取得良好的使用效果高質量發展，3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存資源配置，并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融。
     如果有細(xì)菌或真菌污染攻堅克難，會嚴(yán)重影響檢測效果機遇與挑戰。
     染色后宜盡快檢測，時(shí)間過長可能會導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加相關。
     如果細(xì)胞收集過程中使用了胰酶取得明顯成效，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC充足，導(dǎo)致染色失敗註入了新的力量。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅表現，在進(jìn)行熒光觀察時(shí)，盡量縮短觀察時(shí)間說服力，同時(shí)在操作和存放過程中也盡量注意避光保存的積極性。
     用于流式細(xì)胞儀檢測時(shí)，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過多的PI假陽性細(xì)胞深刻變革，并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善高效，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測，這樣通持陵P重要？梢杂行p少假陽性的壞死細(xì)胞效率。
     需自備PBS。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用逐漸顯現，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品重要性，不得存放于普通住宅內(nèi)著力增加。
     為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作系統穩定性。