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CT-26細胞公司相關產(chǎn)品:G蛋白轉錄因子α2/Gα t2抗體PPAR alpha/FITC 熒光素標記α型-過氧化酶活化增生受體抗體IgG脊髓性肌癥蛋白SMA抗體PPAR Gamma /FITC 熒光素標記過氧化酶活化增生受體γ抗體IgG
產(chǎn)品分類
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產(chǎn)品名稱:小鼠結腸癌細胞更高要求;CT-26
英文簡稱:CT-26細胞
貨號:LZ-X968626
規(guī)格:T25
生長特性:貼壁生長
凍存培養(yǎng)基:
凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基積極參與。凍存培養(yǎng)基中應含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基經驗分享。
1)細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型*凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化新技術,可改善細胞活力以及解凍后的細胞復蘇效果培養。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學成分確定的、無蛋白趨勢、無菌凍存培養(yǎng)基高效流通,含10% DMSO,適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細胞凍存方案:
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程有力扭轉。詳細的實驗方案,必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書深入。
1.配制凍存培養(yǎng)基形式,于2°C至8°C下儲存,直至使用一站式服務。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系功能。
2.凍存貼壁細胞時,利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來支撐作用。用該細胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細胞關鍵技術。
3.采用、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比。根據(jù)所需活細胞密度有所提升,計算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘參與能力。在無菌條件下小心倒掉上清液法治力量,不要攪動細胞沉淀長期間。
注:離心速度和時間取決于細胞種類。
5.用預冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀表現,將其調整至該細胞適合的活細胞密度異常狀況。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時的積極性,應不時輕輕混合細胞更多可能性,使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞高效,使溫度每分鐘大約降低 1°C分析。或者質量,將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。
實驗材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶不久前;8ml小牛血清(FCS) 1瓶緊迫性;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個機構;
3非常激烈、50ml離心筒2個
4、滅菌培養(yǎng)皿1個更適合,細胞培養(yǎng)瓶1個
5技術交流、1ml ,200μl移液器各1支引人註目;槍頭盒2個關註;無菌玻璃攪拌棒1個
6、細胞計數(shù)板1塊拓展;
7提供堅實支撐、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把大面積;
8發力、酒精燈1臺;
實驗報告:
一集成應用、分離與培養(yǎng):
1越來越重要的位置、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織迎來新的篇章,然后用PBS將此組織塊清洗2次解決方案,最后將組織剪成1mm3左右大小共同學習;
2交流研討、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶)推動並實現,混懸10s,置37℃條件下消化10min順滑地配合,之后用滴管吹打制成單細胞懸液更加完善,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置上高質量;
3精準調控、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s建設應用,置37℃消化10 min后優化程度,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次應用的因素之一,直至組織*被消化基礎;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液奮勇向前,1200r/min 離心10min引領作用,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸經驗,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)善於監督;
5、差速貼壁1h后豐富內涵,吸出培養(yǎng)基數據,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二搶抓機遇、免疫熒光鑒定:
1綠色化發展、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基結論,用溫育的PBS沖洗細胞2次應用創新,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min足夠的實力;
2和諧共生、PBS沖洗細胞2次,每次10min全面闡釋,然后在4℃條件下用上了,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3適應性強、PBS沖洗細胞2次的特性,每次10min競爭力所在,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min高效;
4先進的解決方案、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜領域;
5研究進展、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗體系流動性, 37℃條件下放置1h;
6深度、用PBS沖洗3次助力各行,每次10min,最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照帶來全新智能。
4-溴-2-三氟酚大腸埃希氏菌(大腸桿菌)拉丁屬名: Candida friedrichii
4-三氟氧溴芐弗氏假絲酵母拉丁屬名: Streptomyces yatensis
4-三氟氧溴芐耶特鏈霉菌拉丁屬名: Rhizobium herbae
4-三氟氧溴芐根瘤菌屬拉丁屬名: Saccharomyces diastaticus
2,4-二苯糖化酵母拉丁屬名: Lactobacillus paracasei
2,4-二苯類干酪乳桿菌拉丁屬名: Bensingtonia yamatoana
異丁司特扶桑本森頓酵母拉丁屬名: Mucor parvispora
異丁司特小孢毛霉拉丁屬名: Natrinema sp.
4-水楊鹽古桿菌拉丁屬名: Bacillus thuringiensis
4-水楊蘇云金芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus subtilis
(5-羧戊)三苯溴化磷枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Escherichia coli
(5-羧戊)三苯溴化磷大腸埃希氏菌拉丁屬名: Gracilibacilllus orientalis
(5-羧戊)三苯溴化磷東邊纖細芽孢桿菌拉丁屬名: Vibrio shilonii
4,5-二氮芴-9-卡察夫氏弧菌拉丁屬名: Streptomyces roseochromogenes
1-引唑-3-羧玫瑰產(chǎn)色鏈霉菌用途: 產(chǎn)生代謝產(chǎn)物具有抑菌活性
1-引唑-3-羧孔雀石(綠)鏈霉菌拉丁屬名: Escherichia coli
CT-26細胞端粒結合蛋白1抗體流式免疫組化大鼠胰島瘤互動互補;INS-1
D-丙氨醇Walker氏癌肉瘤256瘤株;W256
β-葡萄糖苷酸酶大鼠骨髓瘤自主研發;IR983F
5-溴-4氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷大鼠嗜堿性粒性白血擦Χ?。籖BL-2H3
馬脾鐵蛋白大鼠癌意向;SHZ-88
轉鐵蛋白大鼠肝癌;RH-35
19-119kDa預先染色分子量MARK大鼠肝癌;CBRH-7919 [CBRH7919]
6-磷酸葡萄糖鋇鹽大鼠腦膠質瘤調解製度;C6
注意事項:
盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復凍融5次對于其檢測效果無顯著影響深入,但為取得良好的使用效果,3-6個月內推薦4℃保存覆蓋範圍,并適當注意避免反復凍融一站式服務。
如果有細菌或真菌污染,會嚴重影響檢測效果前沿技術。
染色后宜盡快檢測支撐作用,時間過長可能會導致凋亡或壞死細胞的數(shù)量增加。
如果細胞收集過程中使用了胰酶深入交流,需注意設法去除殘留的胰酶解決。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC,導致染色失敗相關。
熒光物質均易發(fā)生淬滅取得明顯成效,在進行熒光觀察時,盡量縮短觀察時間影響力範圍,同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存大力發展。
用于流式細胞儀檢測時約定管轄,如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細胞,并且通過調整相關設置和參數(shù)也無法改善集成技術,可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進行檢測新創新即將到來,這樣通常可以有效減少假陽性的壞死細胞創新的技術。
需自備PBS設計能力。
本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學研究用,不得用于臨床診斷或治療有序推進,不得用于食品或藥品適應性,不得存放于普通住宅內。
為了您的安全和健康深入開展,請穿實驗服并戴一次性手套操作更優美。