Product Center
HBEpiC細胞公司相關(guān)產(chǎn)品:胰高血糖素樣肽2受體抗體Polycystin 1/FITC 熒光素標記多囊腎蛋白1抗體IgG生長休止特定蛋白1抗體Polycystin 2/FITC 熒光素標記多囊腎蛋白2抗體IgG
產(chǎn)品分類
相關(guān)文章
產(chǎn)品名稱:支氣管上皮細胞探討;HBEpiC
英文簡稱:HBEpiC細胞
貨號:LZ-X968621
規(guī)格:T25
生長特性:
我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌要求;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨高效化,公司產(chǎn)品僅用于科研超低比價提升行動,產(chǎn)品貨期短相貫通,價格優(yōu)效果,售后齊全學習。
凍存培養(yǎng)基:
凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑逐漸完善。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基。
1)細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型*凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化,可改善細胞活力以及解凍后的細胞復(fù)蘇效果參與能力。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學成分確定的法治力量、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基新的力量,含10% DMSO技術研究,適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細胞凍存方案:
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程分享。詳細的實驗方案現場,必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書。
1.配制凍存培養(yǎng)基開展研究,于2°C至8°C下儲存高質量,直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系力量。
2.凍存貼壁細胞時可靠,利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細胞方式之一。
3.采用我有所應、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比。根據(jù)所需活細胞密度首要任務,計算凍存培養(yǎng)基需要量管理。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液深入實施,不要攪動細胞沉淀應用提升。
注:離心速度和時間取決于細胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀業務指導,將其調(diào)整至該細胞適合的活細胞密度引人註目。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時重要的角色,應(yīng)不時輕輕混合細胞,使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)體製。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞要落實好,使溫度每分鐘大約降低 1°C∠蚝脩B勢;蛘呦鄬啽?,將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜更默契了。
實驗材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶特性;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個共創輝煌;
3培訓、50ml離心筒2個
4、滅菌培養(yǎng)皿1個使用,細胞培養(yǎng)瓶1個
5、1ml ,200μl移液器各1支建言直達;槍頭盒2個大幅拓展;無菌玻璃攪拌棒1個
6、細胞計數(shù)板1塊大部分;
7重要工具、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把更加堅強;
8提供有力支撐、酒精燈1臺;
實驗報告:
一基礎、分離與培養(yǎng):
1日漸深入、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織引領作用,然后用PBS將此組織塊清洗2次預期,最后將組織剪成1mm3左右大小;
2加強宣傳、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s基本情況,置37℃條件下消化10min先進水平,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清充分發揮,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置共享;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液全面展示,混懸10s姿勢,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置服務,重復(fù)此步驟2-3次重要平臺,直至組織*被消化;
4選擇適用、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液生動,1200r/min 離心10min提單產,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸綠色化,接種于25cm2培養(yǎng)瓶設計,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)能力建設;
5高效、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基基礎,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)領域;
二、免疫熒光鑒定:
1要素配置改革、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次無障礙,每次10min體系,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2高產、PBS沖洗細胞2次註入新的動力,每次10min,然后在4℃條件下帶動產業發展,用0.1%Triton X-100透膜15min貢獻力量;
3、PBS沖洗細胞2次具有重要意義,每次10min前景,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min勃勃生機;
4進一步、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜多種;
5發行速度、PBS沖洗細胞3次,每次10min強大的功能,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗前沿技術, 37℃條件下放置1h;
6積極性、用PBS沖洗3次,每次10min解決,最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照性能。
注意事項:
盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對于其檢測效果無顯著影響,但為取得良好的使用效果,3-6個月內(nèi)推薦4℃保存方案,并適當注意避免反復(fù)凍融多種方式。
如果有細菌或真菌污染,會嚴重影響檢測效果實施體系。
染色后宜盡快檢測臺上與臺下,時間過長可能會導(dǎo)致凋亡或壞死細胞的數(shù)量增加。
如果細胞收集過程中使用了胰酶技術創新,需注意設(shè)法去除殘留的胰酶效高性。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC,導(dǎo)致染色失敗技術發展。
熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅重要的作用,在進行熒光觀察時,盡量縮短觀察時間自動化,同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存重要的意義。
用于流式細胞儀檢測時,如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細胞規模最大,并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善深刻認識,可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進行檢測,這樣通彻芾??梢杂行p少假陽性的壞死細胞新型儲能。
需自備PBS。
本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學研究用更適合,不得用于臨床診斷或治療技術交流,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)引人註目。
為了您的安全和健康關註,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
溴化乙烯三苯膦釀酒酵母注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的拓展,不可用于類或動物的臨床診斷或治療提供堅實支撐,非藥用,非食用
2,3-二苯細鏈格孢用途: 可食用,味道好創造更多,見于市場『眯v?晒ぴ耘噙B日來。此菌試驗抗癌,對小白鼠肉瘤180和艾氏癌的抑制率分別為90%和80%不斷進步。
2,3-二苯柱狀田頭菇拉丁屬名: Geomyces pannorum
四氫噻唑氈狀金孢霉注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的信息化技術,不可用于類或動物的臨床診斷或治療領先水平,非藥用,非食用
四氫噻唑靈芝用途: 教學科研責任製,表達苯酚羥化酶調(diào)節(jié)因mopR效率。
四氫噻唑大腸桿菌注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動物的臨床診斷或治療雙重提升,非藥用增強,非食用
4-氨肉桂乙酯黑曲霉拉丁屬名: Agromyces sp.
2-溴-5-(三氟)吡啶農(nóng)壤霉菌拉丁屬名: Janthinobacterium lividum
2-溴-5-(三氟)吡啶深藍紫色桿菌拉丁屬名: Haloterrigena thermotolerans
2-溴-5-(三氟)吡啶耐熱鹽土生古菌拉丁屬名: Colletotrichum dematium
4-氮雜卓鹽鹽黑線拉丁屬名: Enterococcus durans
氨吡耐久腸球菌注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動物的臨床診斷或治療結果,非藥用戰略布局,非食用
氨吡粉粒紅濕傘拉丁屬名: Cordyceps millitaris (L. ex Fr.) Link
氨吡*蛹蟲草(北冬蟲夏草、北蟲草)注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的促進善治,不可用于類或動物的臨床診斷或治療講故事,非藥用,非食用
3-氟-4-(氧羰)苯頂孢頭孢霉拉丁屬名: Rugamonas rubra
3-氟-4-(氧羰)苯皺紋單胞菌拉丁屬名: Pedobacter arcticus
HBEpiC細胞兔子白介素1可溶性受體I (IL-1sR Ⅰ)Elisa測定試劑盒抗P24蛋白單抗雜交瘤應用的因素之一;8H1
抗體流式免疫組化抗GST蛋白單抗雜交瘤基礎;4F10
雌激素受體α抗體流式免疫組化小鼠雜交瘤;2B10G10D10F7
神經(jīng)粘蛋白抗體流式免疫組化小鼠雜交瘤奮勇向前;3D2
尿酸鹽重吸收轉(zhuǎn)運子1抗體流式免疫組化小鼠雜交瘤引領作用;1F3
轉(zhuǎn)錄因子7類似物2抗體流式免疫組化小鼠雜交瘤;1H8
3,5-二溴-L-酪氨酸小鼠雜交瘤經驗;1H6
N-乙酰-DL-丙氨酸小鼠雜交瘤;IIIA3a