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BeWo細胞公司相關(guān)產(chǎn)品:生長調(diào)節(jié)致癌因gamma(GROγ)抗體Phospho-PERK (Thr980)/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化蛋白激酶樣內(nèi)質(zhì)網(wǎng)激酶抗體IgGG蛋白信號調(diào)節(jié)蛋白2抗體peripherin/FITC 熒光素標(biāo)記外周蛋白抗體IgG
產(chǎn)品分類
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產(chǎn)品名稱:胎盤絨膜癌細胞帶動產業發展;BeWo
英文簡稱:BeWo細胞
貨號:LZ-X968553
規(guī)格:T25
生長特性:貼壁生長
凍存培養(yǎng)基:
凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基工藝技術。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基。
1)細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型*凍存培養(yǎng)基系統,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化,可改善細胞活力以及解凍后的細胞復(fù)蘇效果規模。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的逐步顯現、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO近年來,適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細胞凍存方案:
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程事關全面。詳細的實驗方案交流等,必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書。
1.配制凍存培養(yǎng)基發展目標奮鬥,于2°C至8°C下儲存自動化裝置,直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系。
2.凍存貼壁細胞時發揮效力,利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來全面革新。用該細胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細胞。
3.采用穩定發展、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比。根據(jù)所需活細胞密度明顯,計算凍存培養(yǎng)基需要量更好。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液基礎上,不要攪動細胞沉淀安全鏈。
注:離心速度和時間取決于細胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀預下達,將其調(diào)整至該細胞適合的活細胞密度增持能力。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時創新為先,應(yīng)不時輕輕混合細胞重要的意義,使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞規模最大,使溫度每分鐘大約降低 1°C關註度。或者重要手段,將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中穩中求進,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。
實驗材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶不折不扣;8ml小牛血清(FCS) 1瓶再獲;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個最深厚的底氣;
3敢於挑戰、50ml離心筒2個
4、滅菌培養(yǎng)皿1個提供了有力支撐,細胞培養(yǎng)瓶1個
5飛躍、1ml ,200μl移液器各1支積極;槍頭盒2個大數據;無菌玻璃攪拌棒1個
6、細胞計數(shù)板1塊經驗;
7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把;
8重要部署、酒精燈1臺等地;
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1數字技術、無菌條件下共享應用,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次尤為突出,最后將組織剪成1mm3左右大星闆r較常見。?/span>
2標準、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶)喜愛,混懸10s,置37℃條件下消化10min規則製定,之后用滴管吹打制成單細胞懸液講道理,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置表現明顯更佳;
3更加廣闊、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s性能穩定,置37℃消化10 min后試驗,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次數字化,直至組織*被消化新格局;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液開展攻關合作,1200r/min 離心10min特點,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸情況正常,接種于25cm2培養(yǎng)瓶製度保障,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)各領域;
5顯示、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基的有效手段,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)共同努力;
二、免疫熒光鑒定:
1真正做到、待心房肌細胞生長至80%融合時發展邏輯,棄去培養(yǎng)基方案,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min發展機遇,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min創新延展;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min長效機製,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min記得牢;
3研究與應用、PBS沖洗細胞2次,每次10min迎難而上,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min激發創作;
4更高效、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜探索;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min重要作用,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗堅持先行, 37℃條件下放置1h;
6增幅最大、用PBS沖洗3次具體而言,每次10min,最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照滿意度。
1-溴-4-n-丁苯科貝特氏菌屬拉丁屬名: coli
1-溴-4-n-丁苯大腸埃希菌拉丁屬名: Spirosoma linguale
1-溴-4-n-丁苯舌螺狀菌拉丁屬名: Bacillus cereus
1-溴-4--2-蠟狀芽孢桿菌拉丁屬名: Mucor lausannensis
1-溴-4--2-勞地毛霉拉丁屬名: Bacillus subtilis
1-溴-4--2-枯草芽孢桿菌用途: 固氮
異丁葉酯根瘤菌拉丁屬名: Planococcus sp.
N-芐乙二游動球菌拉丁屬名: coli
1,1,2-三-1H-苯并[e]吲哚大腸埃希菌拉丁屬名: Bacillus sp.
1,1,2-三-1H-苯并[e]吲哚芽孢桿菌屬用途: 食奮戰不懈、藥用
1,1,2-三-1H-苯并[e]吲哚平田頭菇拉丁屬名: Ceri aviridans
伍德沃德氏試劑K微綠蠟質(zhì)菌拉丁屬名: Bacillus subtilis subsp. subtilis
間二芐硫枯草芽孢桿菌枯草亞種拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
間二芐硫釀酒酵母注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動物的臨床診斷或治療智慧與合力,非藥用規定,非食用
間二芐硫PL12(平菇)拉丁屬名: Flavobacterium hydatis
RI-1水生黃桿菌拉丁屬名: Arthrobacter agilis
BeWo細胞豚鼠糖化磷脂酰肌特異性磷脂酶D1(GPLD1)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒TCPP[=四(4-羧苯)卟吩][銅和鎘用超高靈敏分光光度試劑][用于和高效液相色譜同時測定金屬]枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Monascus ruber
豚鼠組織蛋白酶D(CTSD)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 6-氟-2-苯紅色紅曲拉丁屬名: coli
豚鼠遲現(xiàn)抗原(VLA)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 2-氟-6-氧苯大腸埃希菌拉丁屬名: Aspergillus flavo-furcatis
豚鼠胃動蛋白2(GKN2)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒2-氟-6-氧苯黃叉曲霉拉丁屬名: coli
豚鼠端粒酶(TE)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒2-氟-6-氧苯大腸埃希菌注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動物的臨床診斷或治療措施,非藥用示範推廣,非食用
豚鼠半乳凝集素7(GAL7)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒2-氟-5-苯(鐮刀菌)DG4注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動物的臨床診斷或治療,非藥用大大縮短,非食用
豚鼠血小板衍生生長因子亞A(PDGFA)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒2-氟-5-苯蟲草屬拉丁屬名: Bifidobacterium longum
豚鼠黑色素瘤關(guān)聯(lián)硫軟骨素蛋白聚糖(MCSP)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 2-氟-5-(三氟)苯長雙歧桿菌拉丁屬名: Sphingomonas faeni
豚鼠胎盤蛋白13 (PP13)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒2-氟-5-(三氟)苯干草鞘氨單胞菌拉丁屬名: rhuriopathiae
豚鼠腫瘤壞死因子α(TNF-α)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒2-氟-5-(三氟)苯豬丹絲菌拉丁屬名: Bacillus subtilis
豚鼠免疫球蛋白E(IgE)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒3,5-二芐氧苯枯草芽孢桿菌注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動物的臨床診斷或治療促進進步,非藥用供給,非食用
豚鼠血清/糖皮質(zhì)激素調(diào)節(jié)激酶2(SGK2)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒3,5-二芐氧苯香菇注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的全過程,不可用于類或動物的臨床診斷或治療,非藥用積極參與,非食用
豚鼠核因子相關(guān)κB結(jié)合蛋白 (NFRκB)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒雙(2--8-羥喹啉-N1,O8)-(1,1'-聯(lián)苯-4-羥)鋁紅栓菌拉丁屬名: Pseudoxanthobacter sp.
豚鼠葡萄糖激酶調(diào)節(jié)蛋白(GKRP)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 (R)-芐氧環(huán)氧乙烷假黃色桿菌屬拉丁屬名: Aspergillus versicolor
豚鼠內(nèi)分泌腺來源的血管內(nèi)皮生長因子(EG-VEGF/PK1)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 (R)-芐氧環(huán)氧乙烷雜色曲霉拉丁屬名: Nocardiopsis lucentensis
豚鼠鈣非依賴性磷脂酶A2(iPLA2)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒1-環(huán)戊盧森坦類諾卡氏菌拉丁屬名: Bacillus amyloliquefaciens
注意事項:
盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對于其檢測效果無顯著影響優勢領先,但為取得良好的使用效果,3-6個月內(nèi)推薦4℃保存探討,并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融明顯。
如果有細菌或真菌污染,會嚴(yán)重影響檢測效果基石之一。
染色后宜盡快檢測基礎上,時間過長可能會導(dǎo)致凋亡或壞死細胞的數(shù)量增加。
如果細胞收集過程中使用了胰酶行業分類,需注意設(shè)法去除殘留的胰酶預下達。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC,導(dǎo)致染色失敗應用領域。
熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅創新為先,在進行熒光觀察時,盡量縮短觀察時間統籌推進,同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存行業內卷。
用于流式細胞儀檢測時,如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細胞科普活動,并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善凝聚力量,可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進行檢測,這樣通持饾u完善?梢杂行p少假陽性的壞死細胞。
需自備PBS。
本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用保護好,不得用于臨床診斷或治療能力和水平,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)充足。
為了您的安全和健康註入了新的力量,請穿實驗服并戴一次性手套操作。