RT-PCR試劑盒適用于以RNA為模板合成一鏈cDNA的反轉(zhuǎn)錄使用，以及后續(xù)的PCR擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)充足。本試劑盒選用優(yōu)異的M-MLV RT酶全技術方案，可以合成大于5kb的一鏈cDNA學習；反轉(zhuǎn)錄過程中的特異的RNase抑制劑可有效降低由于外源RNase污染而導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗的風(fēng)險意料之外。本試劑盒使用方便過程中、快捷深刻認識，可廣泛用于cDNA克隆及目的基因檢測等分子生物實(shí)驗(yàn)首要任務。
RNA濃度和純度分析：
濃度計算：對于單鏈RNA，OD260＝1.0時新型儲能，RNA濃度為40μg/ml深入實施，稀釋時OD260＝0.1時，其RNA濃度為4μg/ml技術交流。
純度分析：純凈的RNA樣品其OD260/OD280的比值應(yīng)介于1.8-2.0交流。小于此比值說明有蛋白或苯酚污染，如果比值大于2.0關註，則可能被異硫氰酸胍污染溝通協調；OD260/OD230比值應(yīng)大于2.0拓展，如果小于此比值說明有小分子及鹽類污染。
濃度測定：
使用RNA濃度測定儀活動，測定樣品A260和A280值。根據(jù)A260/A280比值，估測RNA質(zhì)量還不大。一般A260/A280比值在1.8-2.0之間創新科技，可以滿足實(shí)驗(yàn)要求。在100μl RNA原液中取1μl稀釋至250μl（DEPC處理的水）特性，測定樣品的A260和A280的值服務機製，按下列公式計算其濃度：
RNA原液濃度=A260×稀釋倍數(shù)×40（ng/μl）。
測定RNA濃度基本操作步驟：
1.取1μl RNA原液共創輝煌，放在0.5ml EP管中培訓，加入249μl dd H2O，用移液槍反復(fù)混勻使用。
2.用dd H2O為空白對照，調(diào)節(jié)A260零點(diǎn)。
3.倒掉比色杯中的水建言直達，加入稀釋并混合均勻的RNA樣液大幅拓展，測定A260值。倒掉比色杯中的RNA樣液大部分，用dd H2O沖洗比色杯重要工具，再調(diào)節(jié)A280零點(diǎn)。
4.倒掉比色杯中的水優化程度，加入稀釋并混合均勻的RNA樣液廣度和深度，測定A280值應用的因素之一。計算A260/A280比值基礎，比值≥1.8，滿足實(shí)驗(yàn)要求奮勇向前。
5.RNA原液濃度=A260×稀釋倍數(shù)×40（ng/μl）引領作用。
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更新時間：2024-03-14
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