小鼠ELISA試劑盒采用雙抗體夾心法，單抗包被于酶標(biāo)板上規模，標(biāo)本和標(biāo)準(zhǔn)品中的小鼠試劑會與單抗結(jié)合逐步顯現，游離的成分被洗去作用。加入生物素化的抗小鼠試劑抗體和辣根過氧化物酶標(biāo)記的親和素，生物素與親和素特異性結(jié)合;抗小鼠試劑抗體與結(jié)合在單抗上的小鼠試劑結(jié)合而形成免疫復(fù)合物，游離的成分被洗去銘記囑托。加入顯色底物事關全面，若反應(yīng)孔中有小鼠試劑，辣根過氧化物酶會使無色的顯色劑現(xiàn)藍(lán)色製造業，加終止液變黃發展目標奮鬥。在450 nm處測OD值，小鼠試劑濃度與OD450值之間呈正比狀態，可通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中小鼠試劑的濃度規劃。
小鼠ELISA試劑盒中一般有兩次抗原抗體反應(yīng)，即加標(biāo)本和加酶結(jié)合物后更多的合作機會们熬?？乖贵w反應(yīng)的完成需要有一定的溫度和時間，這一保溫過程稱為溫育可以使用，有人稱之為孵育兩個角度入手，在ELISA試劑盒中似不恰當(dāng)關註點。
ELISA試劑盒屬固相免疫測定，抗原脫穎而出、抗體的結(jié)合只在固相表面上發(fā)生系統。以抗體包被的夾心法為例，加入板孔中的標(biāo)本積極影響，其中的抗原并不是都有均等的和固相抗結(jié)合的機(jī)會方法，只有最貼近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體接觸。這是一個逐步平衡的過程進一步提升，因此需經(jīng)擴(kuò)散才能達(dá)到反應(yīng)的終點重要的意義。在其后加入的酶標(biāo)記抗體與固相抗原的結(jié)合也同樣如此。這就是為什么ELISA試劑盒反應(yīng)總是需要一定時間的溫育規模最大。
溫育常采用的溫度有43℃關註度、37℃、室溫和4℃等重要手段。37℃是實驗室中常用的保溫溫度穩中求進，也是大多數(shù)抗原抗體結(jié)合的合適溫度。在建立ELISA試劑盒方法作反應(yīng)動力學(xué)研究時不折不扣，實驗表明再獲，兩次抗原抗體反應(yīng)一般在37℃經(jīng)1-2小時，產(chǎn)物的生成可達(dá)頂值最深厚的底氣。為加速反應(yīng)敢於挑戰，可提高反應(yīng)的溫度，有些試驗在43℃進(jìn)行應用擴展，但不宜采用更高的溫度過程中。抗原抗體反應(yīng)4℃更為*建立和完善，在放射免疫測定中多使反應(yīng)在冰箱中過夜特征更加明顯，以形成最多的沉淀。但因所需時間太長啟用，在ELISA試劑盒中一般不予采用。
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更新時間：2021-04-13
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