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土壤無(wú)機(jī)磷(S-PHOS)含量檢測(cè)?操作步驟

更新時(shí)間:2021-09-01點(diǎn)擊次數(shù):1855

土壤無(wú)機(jī)磷(S-PHOS)含量檢測(cè)操作步驟:

1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔積極性,在di一效率、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在di一研學體驗、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl結構不合理,混勻;然后從di一孔深刻內涵、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔競爭力,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl逐步改善,混勻特點;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五落實落細、第六孔中意見征詢,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul深入闡釋,混勻集聚;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七確定性、第八孔中明確了方向,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl意料之外,混勻后從第七必然趨勢、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中相對開放,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl重要方式,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl相貫通,濃度分別為180 ng/L增產,120 ng/L ,60 ng/L系統,30 ng/的方法,15 ng/L)。

2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑方法,其余各步操作相同)生產創效、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl進行探討,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)緊密協作。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁管理,輕輕晃動(dòng)混勻。

3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘越來越重要。

4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。

5. 洗滌:小心揭掉封板膜優化上下,棄去液體改革創新,甩干,每孔加滿洗滌液發揮重要作用,靜置30秒后棄去自行開發,如此重復(fù)5次,拍干取得顯著成效。

6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl處理方法,空白孔除外。

7. 溫育:操作同3振奮起來。

8. 洗滌:操作同5建立和完善。

9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl總之,再加入顯色劑B50μl長足發展,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.

10. 終止:每孔加終止液50μl足了準備,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)規模設備。

11. 測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)穩步前行。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘至關重要。

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