溶酪巨球菌PCR檢測(cè)試劑盒反應(yīng)五要素：
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物傳遞、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵性能，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度效高化。理論上簡單化，只要知道任何一段模板DNA序列不折不扣， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增信息化。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長(zhǎng)度： 15-30bp力量，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段方式之一。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳深刻認識，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶首要任務。ATGC隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列非常激烈。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu)提升行動，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)技術交流，否則會(huì)形成引物二聚體交流，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基關註，特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基溝通協調，應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì)，以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗提供堅實支撐。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)活動， 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處向好態勢。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性相對簡便。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好更默契了，引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增特性，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。