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蟹源性成分探針?lè)晒舛縋CR試劑盒使用方法:
測(cè)定法的靈敏度來(lái)自作為報(bào)告的酶。酶是一種有機(jī)催化劑交流等,很少量的酶即可誘導(dǎo)大量的催化反應(yīng)發揮重要帶動作用,產(chǎn)生可供觀察的顯色反應(yīng)現(xiàn)象。因此該體系常被稱為酶放大體系傳遞。
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支應用創新,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋發展成就。 24μg/ml 5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
12μg/ml 4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
6μg/ml 3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
3μg/ml 2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
1.5μg/ml 1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔同期、待測(cè)樣品孔新趨勢。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl鍛造,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品終稀釋度為5倍)新體系。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁共謀發展,輕輕晃動(dòng)混勻搖籃。|
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜創造,棄去液體創新延展,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次強化意識,拍干聽得進。
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外合理需求。
7. 溫育:操作同3全技術方案。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl先進水平,再加入顯色劑B50μl重要的,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl共享,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)高端化。
11. 測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)姿勢。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行充分發揮。