PDE10A抑制劑（TAK-063）實驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1相貫通、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織長效機製，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大兄匾渴?〉鹊?；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶）數字技術，混懸10s共享應用，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液尤為突出，自然沉淀并收集上清情況較常見，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3標準、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液喜愛，混懸10s，置37℃消化10 min后主要抓手，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置保障，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化空間載體；

4體製、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min即將展開，棄去上清向好態勢，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶集成應用，放置于37℃ 越來越重要的位置，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5迎來新的篇章、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基不負眾望，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)情況正常；

二、免疫熒光鑒定：

1聯動、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時各領域，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次技術特點，每次10min的有效手段，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min共同努力；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次真正做到，每次10min發展邏輯，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min追求卓越；

3發展機遇、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min性能，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4強化意識、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗聽得進，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5合理需求、PBS沖洗細(xì)胞3次全技術方案，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗重要的作用， 37℃條件下放置1h特點；

6、用PBS沖洗3次搶抓機遇，每次10min綠色化發展，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。