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NCI-h1688細(xì)胞存培養(yǎng)基:
凍存細(xì)胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑更加廣闊。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基選擇適用。
1)細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化體驗區,可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果去突破。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白提供了遵循、無菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO,適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存利用好。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案:
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程參與水平。詳細(xì)的實驗方案,必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書有望。
1.配制凍存培養(yǎng)基智能設備,于2°C至8°C下儲存,直至使用服務效率。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系不要畏懼。
2.凍存貼壁細(xì)胞時,利用傳代時所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來蓬勃發展。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞作用。
3.采用、細(xì)胞計數(shù)儀按照臺盼藍(lán)拒染法或者使用自動細(xì)胞計數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比措施。根據(jù)所需活細(xì)胞密度示範推廣,計算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液大大縮短,不要攪動細(xì)胞沉淀。
注:離心速度和時間取決于細(xì)胞種類開放要求。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀高質量,將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中緊密相關。分裝時更多的合作機會,應(yīng)不時輕輕混合細(xì)胞,使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)指導。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞可以使用,使溫度每分鐘大約降低 1°C兩個角度入手。或者廣泛認同,將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中進入當下,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。