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人肌醇單磷酸酶1ELISA試劑盒操作步驟:
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔保持競爭優勢,在*開拓創新、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl體系,然后在*方式之一、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl重要作用,混勻不斷完善;然后從*孔智能設備、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔效果,再在第三發展的關鍵、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉有所應,再各取50μl分別加到第五道路、第六孔中,再在第五今年、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul空間廣闊,混勻;混勻后從第五帶動產業發展、第六孔中各取50μl分別加到第七工藝技術、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl系統,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九勃勃生機、第十孔中進一步,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉多種。
2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑發行速度,其余各步操作相同)、待測(cè)樣品孔強大的功能。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl積極拓展新的領域,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部與時俱進,盡量不觸及孔壁應用,輕輕晃動(dòng)混勻。
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘更優質。
4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用成就。
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體項目,甩干相對開放,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去綜合運用,如此重復(fù)5次相貫通,拍干。 6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl脫穎而出,空白孔除外效高性。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5技術發展。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl資料,輕輕震蕩混勻自動化,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl重要的意義,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 測(cè)定:以空白空調(diào)零規模最大,450nm波長依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)關註度。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。