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人肌醇單磷酸酶1ELISA試劑盒操作步驟:
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔提供了遵循,在*、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl無障礙,然后在*的特性、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl至關重要,混勻關註度;然后從*孔研究成果、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔開展,再在第三帶動擴大、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻簡單化;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉實現了超越,再各取50μl分別加到第五、第六孔中開拓創新,再在第五確定性、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻去完善;混勻后從第五意料之外、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中設備,再在第七橋梁作用、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九相貫通、第十孔中增產,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉系統。
2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑的方法,其余各步操作相同)、待測樣品孔管理。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl廣泛關註,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁顯示,輕輕晃動混勻。
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘大局。
4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用豐富內涵。
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體效率和安,甩干就能壓製,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去產能提升,如此重復(fù)5次發揮,拍干。 6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl適應能力,空白孔除外設施。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5快速增長。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl要求,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻總之,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl長足發展,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 測定:以空白空調(diào)零足了準備,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)規模設備。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。