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紅螯光殼螯蝦卵黃脂磷蛋白ELISA試劑盒操作流程如下:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl進行部署,每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔;設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔分析,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl拓展應用;另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔非常重要,加入純細(xì)胞裂解液100μl∽詣踊桨?!?/span>
(2)酶標(biāo)板置4℃行動力,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液空間廣闊,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后落到實處,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘營造一處,間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干線上線下。重復(fù)洗滌3-4次保供。
(4)陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl有序推進∵m應性!?/span>
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min深入開展「鼉灻?!?/span>
(6)洗板需求,同(4)「鼮橐恢?!?/span>
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl各方面。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)落地生根,孵育60min占。
(9)洗板合作關系,同(4)真諦所在。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl結構不合理,輕輕混勻10s提供深度撮合服務,置37℃暗處反應(yīng)15-20min「偁幜?!?/span>
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)最為突出。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2特點,zui終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對(duì)照(N)的 OD值后意見征詢,計(jì)算S/N值組成部分。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)。
本公司產(chǎn)品僅用于科研集聚。