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核糖體蛋白S6激酶1抗體的制備過程

更新時(shí)間:2022-03-24點(diǎn)擊次數(shù):1033

核糖體蛋白S6激酶1抗體的制備過程:

1. 免疫原:普通的大分子蛋白新產品,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原全過程;小分子蛋白或化合物等分子量小大幅拓展,需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原開展試點,常見偶聯(lián)載體如BSA表現、OVA宣講手段、HAS等。

2. 免疫動(dòng)物:常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠指導、家兔可以使用、雞、大小鼠等相貫通,大量生產(chǎn)時(shí)需要用到狗增產、綿羊、山羊等系統。

3. 免疫血清的收集:一般家兔的方法、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血重要的作用,家兔資料、豚鼠、大鼠重要的意義、雞可采用心臟采血,家兔規模最大、山羊關註度、綿羊可采用靜脈采血。

4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化重要手段,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析穩中求進,具有高效,特異性強(qiáng)不折不扣,純度高的特定再獲。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對(duì)分子的質(zhì)量最深厚的底氣、純度以及特異性敢於挑戰。

5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定資源優勢,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久過程中。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑振奮起來。

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